【摘 要】
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目的:研究大鼠骨髓间质干细胞(MSCs)体外分离,培养和扩增方法,使其保持干细胞特性(自我更新和多向分化潜能),为骨髓间质干细胞的应用奠定基础;并用熟地体外诱导骨髓间质干细胞分化
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目的:研究大鼠骨髓间质干细胞(MSCs)体外分离,培养和扩增方法,使其保持干细胞特性(自我更新和多向分化潜能),为骨髓间质干细胞的应用奠定基础;并用熟地体外诱导骨髓间质干细胞分化为神经样细胞,为将骨髓间质干细胞用作细胞替代疗法的种子细胞提供良好的理论和试验依据。
方法:取大鼠股骨中的骨髓问质干细胞进行体外培养。去除不贴壁的细胞,在倒置显微镜下逐日观察细胞的形态和生长情况。细胞传至第三代后利用熟地含药血清对骨髓间质干细胞进行体外诱导,诱导骨髓间质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)向神经元转化,观察分化过程中细胞形态、数目的变化,观察免疫细胞化学检测分化后神经细胞标志蛋白nestin、NSE、GFAP是否表达,并计算转化率。
结果:①熟地含药血清诱导后,MSCs能分化为具有典型神经元形态的细胞,并明显表达NSE、nestin,GFAP表达极低;②空白血清组的诱导效果明显低于含药血清组的诱导效果(P<0.05)。③β-巯基乙醇的诱导效果明显高于中药含药血清的诱导效果(p<0.05),但对细胞的损害较大。④低剂量药物组与中剂量药物组之间的差别无统计学意义(p>0.05),高剂量药物组与中剂量药物组之间的差别无统计学意义(p>0.05),高计量药物组与低剂量药物组之间的差别有统计学意义(p<0.05)。
结论:骨髓间质干细胞可进行体外分离和培养。熟地含药血清有诱导骨髓间质干细胞向神经细胞分化的作用。
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