乳腺癌是众多威胁女性健康的恶性肿瘤之一。随着人类对乳腺癌深入研究发现携带有抑癌基因BRCA1突变的患者比常人更易患病。BRCA1蛋白可维持基因组稳定性,其突变会影响RAD51蛋白的修复功能,使肿瘤细胞产生耐药性。为了改善RAD51蛋白的修复功能,我们对BRCA1蛋白进行突变,研究突变肽与RAD51的相互作用。选择BRCA1蛋白中的保守片段BRCA1^846-871作为研究的多肽,以RAD51蛋白中的关键肽段为受体,通过计算机辅助设计并筛选出与RAD51蛋白相互作用较强的BRCA1^846-871单突变肽6条和五突变肽9条。采用固相合成法将目标多肽合成并利用反相高效液相色谱技术对这些多肽分离纯化得到纯度大于93%的目标产物。使用电喷雾电离质谱技术对这些多肽进行表征。通过圆二色光谱法和荧光光谱法研究BRCA1^846-871及其突变肽与RAD51关键肽段的相互作用。圆二色谱图显示,任意一条BRCA1片段配体均使RAD51关键肽段的二级结构发生了变化。单突变肽中,F、G、E和N使RAD51^181-200受体的二级结构含量下降数值分别为60.3～36.2%、60.3～36.4%、60.3～36.5%和60.3～36.0%。BRCA1^846-871、Y和P使RAD51^181-200受体的α螺旋结构含量下降数值分别为60.3～56.3%、60.3～58.2%和60.3～58.3%。五突变肽中,BRCA1^846-871、P1、P3、P5、P6和P7使RAD51^158-180受体的二级结构含量下降数值分别为46.0～28.4%、46.0～31.7%、46.0～31.9%、46.0～31.6%、46.0～23.8%和46.0～31.9%。而P2、P4、P8和P9对RAD51^158-180受体二级结构含量几乎不产生影响;P1、P4和P5使RAD51^181-200受体的二级结构含量下降数值分别为60.5～35.7%、60.5～36.3%和60.5～36.4%。BRCA1^846-871、P3、P6和P9使RAD51^181-200受体的二级结构含量下降数值分别为60.5～56.3%、60.5～55.6%、60.5～55.6%和60.5～54.6%。P2、P7和P8对RAD51^181-200受体二级结构含量几乎不产生影响。荧光谱图显示,任意一条BRCA1片段配体均使RAD51关键肽段发生了荧光猝灭。在室温下,单突变中F(1.00×10⁵M^-1)和Y(1.16×10⁵M^-1)与RAD51^181-200片段受体的结合较强;五突变中BRCA1^846-871(1.27×10⁵ M^-1)、P1(3.34×10⁴ M^-1)、P3(1.18×10⁴ M^-1)、P8(1.02×10⁴ M^-1)和P9(2.01×10⁵ M^-1)与RAD51^158-180片段受体的结合较强;P1(4.17×10⁴ M^-1)、P4(7.61×10⁴ M^-1)和P5(1.19×10⁴ M^-1)与RAD51^181-200片段受体的结合较强。综合圆二色谱与荧光光谱分析结果可以看出,298 K温度下单突变肽中F和Y与RAD51^181-200片段受体作用最好;298 K温度下五突变肽中P9与RAD51^158-180片段受体作用最好;298 K温度下五突变肽中P4与RAD51^181-200片段受体作用最好。