蛋白质分子印迹聚合物选择性识别机制及蛋白质复性研究

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蛋白质分子印迹技术有着良好的应用前景,近年来已成为研究热点之一。本文考察了不同类型的洗脱液对本体聚合方法制备的牛血清白蛋白(BSA)印迹聚合物模板分子的洗脱率、再结合率的影响,结果表明去除模板分子BSA的洗脱液的变性作用越强,模板分子的洗脱率越高,而再结合率表现为一定程度的下降;同时考察了BSA分子印迹聚合物选择性识别模板分子的能力,结果表明BSA分子印迹聚合物能够特异性的吸附BSA分子。结论认为蛋白质模板分子在聚合物中留下的印迹“孔穴”形状是蛋白质分子印迹聚合物识别的基础。 蛋白质复性技术的应用能够有效的弥补目前蛋白质分子印迹技术存在的缺陷,解决蛋白质模板分子重复利用的问题。采用体积排阻和反相色谱对SDS、盐酸胍、脲完全变性的蛋白质进行了复性研究,结果表明:反相色谱复性效果明显优于体积排阻色谱;在体积排阻色谱流动相中添加辅助折叠成分能够提高复性回收率;还原变性的蛋白质在非氧化还原体系复性液中能够获得较好的复性效果;SDS是三种变性剂中对蛋白质复性影响最为复杂的,SDS变性的蛋白质的复性既要受到SDS浓度的影响又要受到蛋白质自身的理化性质的制约;复性蛋白质的关键在于去除与蛋白质结合的变性剂和保证蛋白质有充足的折叠时间来进行复性。
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