枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)BS-2防治苹果连作障碍的研究

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为研究防治苹果连作障碍的方法,本试验以‘烟富3号/M9-T337’为试材,研究0g、15g、30g、60g和120g的枯草芽孢杆菌新菌株BS-2的特性和对苹果病害、土壤微生物多样性、微生物群落结构、土壤酶活性和氮素的吸收利用的影响,旨在为苹果生产提供生物防治理论和实践依据。主要研究结果如下:1、紫外灯诱变产生的新菌株BS-2可以防治苹果灰斑病、镰刀菌、灰霉病、褐斑病、轮纹病和斑点落叶病,镰刀菌是导致连作障碍的主要病原菌。斑点落叶病的发生是由链格孢菌引起的,通过对BS-2的体内对抗实验可以发现,BS-2可以明显减轻链格孢菌在叶片中的繁殖。2、枯草芽孢杆菌BS-2的分泌物中含有生长素(IAA)和水杨酸(SA),当OD值为600时,浓度分别是0.4ng/ml和1.39ng/ml。60g的枯草芽孢杆菌BS-2可以显著提高叶片比叶重和主干直径,叶片组织中栅栏组织的厚度与对照相比可以增加8.5%。枯草芽孢杆菌BS-2对苹果株高增长量无影响。3、枯草芽孢杆菌BS-2在提高保护酶活性和土壤酶活性方面具有一定的作用。BS-2在增强苹果抗病性上,可以提高苹果叶片中70u/g·FW的POD酶活性、56u/g·FW的SOD酶活性和土壤中的过氧化氢酶活性。BS-2还可以增加与氮磷代谢有关的土壤酶活性,分别是脲酶、硝酸还原酶、亚硝酸还原酶和酸性磷酸酶,降低与氮挥发有关的反硝化还原酶。4、枯草芽孢杆菌BS-2增加了土壤中细菌和真菌的多样性,同时改变土壤微生物的群落结构。BS-2降低了细菌门中Proteobacteria的丰富度,提高了Bacteroidetes和Acidobacteria的丰富度,前者随着BS-2施入量的增加,先降后升,在120g处理中占整个细菌总量最高,达到55.91%,其次是0g处理,而30g处理最低;Bacteroidetes是第二占优势的细菌,施入BS-2后土壤中,其丰富度均高于对照组;Acidobacteria的丰富度以对照组最小,30g处理最大,比对照多5.45个百分点。BS-2增加了细菌属中Blastocatella、Pseudomonas的丰富度,降低了Sphingomonas的丰富度,在0g、15g、30g、60g和120g五个土壤样品中三个优势菌的总丰富度分别是19.02%、21.67%、24.75%、23.65%和43.26%。BS-2对真菌群落结构的影响较大,对照组的优势菌种为Ascomycota、Basidiomycota和Chytridiomycota三种,而BS-2改变了真菌群落中的优势菌种,降低了后两种菌种的丰富度。除了上述三种优势真菌外,施入BS-2后土壤中增加了三个优势菌种。在真菌属上,这种改变更显著,对照组中的优势菌种Stephanospora在处理组中优势减弱,甚至产生新的优势菌种,当BS-2的浓度增加到120g时,土壤样品中优势菌的丰富度均在10%以下。5、枯草芽孢杆菌BS-2促进了苹果对氮素的吸收和利用。15N标记的尿素施入后,发现枯草芽孢杆菌BS-2能够使苹果根部和木质部的干重增加,干重累积增加230g。BS-2还可以提高叶片木质部和韧皮部的Ndff值。BS-2还可以使苹果植株的全氮量从3.44mg增加到7.29mg、提高0.64mg的15N吸收总量。枯草芽孢杆菌BS-2在增加苹果对氮素的利用率方面,以60g处理的效果最好,为30.76%,120g时效果降低,仅为15.93%。氮素主要分配在叶片中最高,可达到40.37%,其次是木质部,最低也为25.27%。BS-2可以显著提高氮素在韧皮部和根部的分配。
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