小一点红(Emilia prenanthoidea DC.)是黔产特色苗药,具有清热解毒,活血化瘀之功效,主治跌打损伤,红白痢,疮疡肿毒,在贵州民间具有年的药用历史,但目前对其多种药理作用与作用机制尚缺少科学依据支撑。本研究通过大鼠口服小一点红醇提物,探究小一点红在大鼠体内的药代动力学。分析小一点红中原儿茶酸、绿原酸、槲皮苷、新西兰牡荆苷和芦丁五种化合物在大鼠血浆中的移行成分及动力学特征;分析五种化合物在大鼠组织中分布情况;分析五种化合物在大鼠体内的排泄情况。通过对小一点红在大鼠体内的吸收、分布和排泄研究,阐明小一点红药材在大鼠体内的动力学特征,为小一点红药材的开发和利用提供理论依据。据《广西植物志》中记载小一点红与一点红同等入药,一点红是中成药花红片的主要原料药材,在治疗妇科炎症方面具有显著疗效。为进一步探究小一点红对妇科炎症的药理作用,本研究中以慢性盆腔炎大鼠为模型,通过口服小一点红醇提物,探究小一点红对慢性盆腔炎大鼠的药理作用。研究如下:一、小一点红中原儿茶酸、绿原酸、槲皮苷、新西兰牡荆苷和芦丁在大鼠体内血浆药代动力学研究建立并验证了同时测定大鼠血浆内原儿茶酸、绿原酸、槲皮苷、新西兰牡荆苷和芦丁的LC-MS/MS方法。考察了该分析方法的专属性、线性、定量限、精密度、准确度、稳定性及基质效应等,考察结果均符合目前对生物样品中含量测定的基本要求。对大鼠口服(灌胃)小一点红高(3.2 g·kg-1)、中(1.6 g·kg-1)、低(0.8 g·kg-1)剂量小一点红醇提物后,在不同时间点于大鼠眼眶取血,以甲酸甲醇为血浆处理中的蛋白沉淀剂,采用LC-MS/MS方法测定血浆样品内化合物含量。拟合非房室模型,采用PKSlover软件求算五种化合物在大鼠体内的药代动力学参数。结果表明,LC-MS/MS分析方法可同时准确、可靠、快速的测定血浆样品中五种化合物的含量,原儿茶酸、绿原酸、槲皮苷、新西兰牡荆苷和芦丁在大鼠血浆内均有原型成分入血并在线性范围内检测到化合物含量。分析大鼠体内三个剂量下,五种化合物动力学参数发现,原儿茶酸出现非线性动力学行为;绿原酸、槲皮苷、新西兰牡荆苷和芦丁出现线性动力学行为。二、小一点红中原儿茶酸、绿原酸、槲皮苷、新西兰牡荆苷和芦丁在大鼠体内组织分布药代动力学研究建立并验证了同时测定大鼠各组织内原儿茶酸、绿原酸、槲皮苷、新西兰牡荆苷和芦丁含量的LC-MS/MS方法。大鼠组织样品检测分析方法以2015年版《中国药典》中生物样品定量分析方法指导原则为依据,对分析方法的专属性、线性、精密度、稳定性和提取回收率进行了考察,结果均符合药典中生物样品分析的基本要求。大鼠口服小一点红醇提物后,于1 h和3 h分别将大鼠处死后取其心、肝、脾、肺、肾、脑和子宫,组织匀浆后,处理制备检测样品,采用LC-MS/MS法测定五种化合物在大鼠各组织含量分布情况。经数理统计结果发现,大鼠口服小一点红1 h后,各化合物在脏器中的分布情况为:脑组织中在线性范围内未检测到五种化合物,原儿茶酸仅在肾脏组织中检测到,线性范围内检测到绿原酸、槲皮苷、新西兰牡荆苷和芦丁的组织和含量大小情况如下:绿原酸为子宫>肺>肝>脾>肾;槲皮苷为肾>子宫>肺>心>脾>肝;新西兰牡荆苷为脾>肝>肺>心>子宫>肾;芦丁为脾>肺>子宫>肝>肾。三、小一点红中原儿茶酸、绿原酸、槲皮苷、新西兰牡荆苷和芦丁在大鼠体内排泄药代动力学研究建立并验证了同时测定大鼠排泄(尿液和粪便)中原儿茶酸、绿原酸、槲皮苷、新西兰牡荆苷和芦丁含量的LC-MS/MS方法。方法学验证结果符合2015年版《中国药典》中生物样品定量分析方法指导原则的基本要求,该实验方法简单、快速、准确的分析大鼠尿液和粪便中五种化合物的含量。大鼠在口服剂量小一点红醇提物后,于2、4、6、8、10、12、24h取大鼠尿液,12、24 h取大鼠粪便,将尿液离心、粪便烘干后取样制备检测样品。经数理统计分析,大鼠口服小一点红醇提物后,原儿茶酸、绿原酸、槲皮苷、新西兰牡荆苷和芦丁在大鼠尿液中总排泄率分别为69.58%,3.75%,4.85%,15.52%,9.84%,在粪便中24 h内的总排泄率为6.37%,0.63%,21.43%,4.13%,0.69%。四、小一点红抗慢性盆腔炎药效学研究采用苯酚胶浆致大鼠子宫炎症为模型,以大鼠体内炎症因子(IL-2、IL-6、TNF-α)含量、大鼠子宫组织病理切片以及子宫肿胀度为指标,对小一点红醇提物抗慢性盆腔炎进行药效学评价。研究发现,与模型组比较,小一点红给药组大鼠体内IL-2、IL-6、TNF-α含量均有所降低,大鼠子宫病变程度有所改善,且大鼠子宫肿胀度有降低。提示小一点红的抗炎作用对治疗慢性盆腔炎大鼠有一定疗效。