论文部分内容阅读
目的:观察模拟不同海拔缺氧环境下对Wistar大鼠心肌的影响,观察红景天苷对模拟不同海拔环境下大鼠心肌细胞的保护作用,探讨红景天苷对心肌细胞凋亡相关蛋白Bcl-2,Bax,Caspase-3,Caspase-9的影响及抗凋亡的机理。方法:60只健康无心脏疾病的Wistar大鼠按照随机分组方法分成兰州海拔组,5000m海拔组,8000m海拔组,每组组内又随机分成生理盐水组和红景天苷组,各组大鼠在进入高海拔模拟实验舱前3天分别行生理盐水灌胃,红景天苷配制液灌胃,量为40mg/kg,每天一次,兰州海拔组置于实验室正常海拔24小时,余两组分别进入5000m及8000m海拔舱24小时。大鼠出舱后及时抽血做血气分析,麻醉后摘取心脏及肺脏,HE染色显微镜下观察心肌细胞及肌纤维变化,免疫组织化学法(IHC)检测不同海拔环境下大鼠心肌细胞凋亡因子Caspase-3基因的表达,原位末端凋亡法(TUNEL)检测心肌细胞凋亡情况,蛋白免疫印迹(Western Blot,WB)检测大鼠心肌细胞凋亡相关蛋白Bcl-2,Bax,Caspase-3,Caspase-9的表达。结果:1.各组大鼠心脏病理切片结果:在兰州海拔下对照组大鼠心肌未见明显病变,在5000m及8000m海拔下大鼠心肌均可见病变,主要表现为心肌细胞肿大、空泡变性、溶解坏死及心肌间质增宽等,8000m海拔下心肌的病变程度明显大于5000m海拔下,红景天苷组大鼠心肌细胞形态变化与对照组相似,心肌细胞肿大及心肌间质增宽程度较对照组有所改善。2.各组大鼠心肌凋亡细胞检测结果:在兰州海拔下对照组出现极少数阳性染色,而5000m及8000m海拔下出现大量染色阳性细胞,8000m下阳性细胞较5000m下更多,红景天苷组兰州海拔下与对照组兰州海拔下相似,在5000m及8000m海拔下染色阳性细胞较对照组组减少,并且与对照组比较均具有统计学意义。(P<0.05)3.各组大鼠心肌凋亡相关蛋白Bcl-2,Bax,Caspase-3,Caspase-9的检测结果:在5000m、8000m高海拔缺氧环境下Bax,Caspase-3,Caspase-9表达增加,Bcl-2表达减少;与对照组比较,红景天苷组Bax,Caspase-3,Caspase-9表达均降低,Bcl-2表达增加,差异具有统计学意义。(P<0.05)结论:1.高海拔急性心肌缺氧会导致大鼠心肌细胞损伤;2.红景天苷注射液对高海拔缺氧环境下大鼠心肌细胞损伤具有保护作用,其作用机制可能与干预心肌细胞中凋亡蛋白Bcl-2,Bax,Caspase-3和Caspase-9,相关。