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目的:运用“半量饮食+左旋肉碱+过度运动”方法建立大鼠过度瘦身模型,探讨过度瘦身后大鼠的卵巢病理、Bcl-2、Bax、VEGF蛋白表达量及性激素变化,为研究过度瘦身对生殖功能的损害程度及左归丸干预后的逆转效应提供科学依据。
方法:选取动情周期规律的雌鼠,随机分为A、B两组,A组造模4周,B组造模8周。A组分为A1、A2、A3、A4组,B组分为B1、B2、B3、B4组,分别为正常组、模型组、恢复饮食组、治疗组。运用“半量饮食+左旋肉碱+过度运动”方法造成大鼠过度瘦身状态,予恢复饮食、左归丸后运用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清性激素;HE染色法检测大鼠卵巢病理组织;免疫组化法检测大鼠卵巢Bcl-2、Bax、VEGF蛋白表达水平。
结果:1.体重变化:造模后体重均下降,4周下降17%,8周下降23%,较正常组相比差异显著(P<0.01)。2.动情周期:造模后动情周期均紊乱,较正常组相比差异显著(P<0.01)。3.血清性激素:造模后FSH、LH水平均升高,E2水平下降,较正常组相比差异显著(P<0.01);单恢复饮食或加左归丸后,FSH、LH下降,E2升高,差异显著(P<0.01或P<0.05)。组间比较:造模8周较造模4周更差,差异显著(P<0.01)。4.卵巢质量及指数:造模4周及8周卵巢质量、指数下降,较正常组相比差异显著(P<0.01);造模4周及8周模型组、恢复饮食组、治疗组比较,卵巢质量、指数有显著差异(P<0.01或P<0.05);组间比较:造模8周卵巢质量、指数较造模4周下降,差异显著(P<0.01或P<0.05)。5.HE染色:造模4周及8周的生长卵泡、成熟卵泡、黄体均明显下降,闭锁卵泡明显增多,较正常组相比差异显著(P<0.01);造模4周及造模8周的模型组、恢复饮食组、治疗组比较,各级卵泡、黄体、闭锁卵泡有显著差异(P<0.01或P<0.05)。组间比较:造模8周各级卵泡、黄体、闭锁卵泡较造模4周差异显著(P<0.01)。6.免疫组化:造模4周及8周模型组的Bcl-2、VEGF的蛋白表达量均下降,Bax蛋白表达量增加,较正常组相比差异明显(P<0.01);造模4周及造模8周的模型组、恢复饮食组、治疗组Bcl-2、Bax、VEGF蛋白表达量差异显著(P<0.01或P<0.05)。组间比较:造模8周各组Bcl-2、Bax、VEGF蛋白的表达量较造模4周有显著差异(P<0.01或P<0.05)。
结论:1.通过“半量饮食+左旋肉碱+过度运动”方法可造成大鼠过度瘦身状态,使大鼠卵巢功能受损。2.造模4周,大鼠体重下降17%,大鼠动情周期明显紊乱,予以恢复饮食+左归丸干预后,体重及动情周期恢复较好;当造模8周,大鼠体重下降23%时,体重及动情周期恢复较差。3.造模4周,大鼠FSH、LH升高,E2下降明显;予以恢复饮食+左归丸干预后,有效下调FSH、LH水平,上调E2水平;当造模8周,各检测指标变化更明显。4.造模4周大鼠卵巢体积明显缩小,闭锁卵泡增加,颗粒细胞及黄体数量减少;予以恢复饮食+左归丸干预后可使受损大鼠卵巢组织恢复;造模8周,各卵泡变化更明显。5.造模4周,Bcl-2、VEGF蛋白表达明显下降,Bax蛋白表达明显升高;予以恢复饮食+左归丸干预后Bcl-2、VEGF蛋白表达增高,Bax蛋白表达下降;在造模4周后,Bcl-2/Bax、VEGF蛋白水平表达变化明显,在造模8周后,Bcl-2/Bax、VEGF蛋白水平表达不显著。
方法:选取动情周期规律的雌鼠,随机分为A、B两组,A组造模4周,B组造模8周。A组分为A1、A2、A3、A4组,B组分为B1、B2、B3、B4组,分别为正常组、模型组、恢复饮食组、治疗组。运用“半量饮食+左旋肉碱+过度运动”方法造成大鼠过度瘦身状态,予恢复饮食、左归丸后运用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清性激素;HE染色法检测大鼠卵巢病理组织;免疫组化法检测大鼠卵巢Bcl-2、Bax、VEGF蛋白表达水平。
结果:1.体重变化:造模后体重均下降,4周下降17%,8周下降23%,较正常组相比差异显著(P<0.01)。2.动情周期:造模后动情周期均紊乱,较正常组相比差异显著(P<0.01)。3.血清性激素:造模后FSH、LH水平均升高,E2水平下降,较正常组相比差异显著(P<0.01);单恢复饮食或加左归丸后,FSH、LH下降,E2升高,差异显著(P<0.01或P<0.05)。组间比较:造模8周较造模4周更差,差异显著(P<0.01)。4.卵巢质量及指数:造模4周及8周卵巢质量、指数下降,较正常组相比差异显著(P<0.01);造模4周及8周模型组、恢复饮食组、治疗组比较,卵巢质量、指数有显著差异(P<0.01或P<0.05);组间比较:造模8周卵巢质量、指数较造模4周下降,差异显著(P<0.01或P<0.05)。5.HE染色:造模4周及8周的生长卵泡、成熟卵泡、黄体均明显下降,闭锁卵泡明显增多,较正常组相比差异显著(P<0.01);造模4周及造模8周的模型组、恢复饮食组、治疗组比较,各级卵泡、黄体、闭锁卵泡有显著差异(P<0.01或P<0.05)。组间比较:造模8周各级卵泡、黄体、闭锁卵泡较造模4周差异显著(P<0.01)。6.免疫组化:造模4周及8周模型组的Bcl-2、VEGF的蛋白表达量均下降,Bax蛋白表达量增加,较正常组相比差异明显(P<0.01);造模4周及造模8周的模型组、恢复饮食组、治疗组Bcl-2、Bax、VEGF蛋白表达量差异显著(P<0.01或P<0.05)。组间比较:造模8周各组Bcl-2、Bax、VEGF蛋白的表达量较造模4周有显著差异(P<0.01或P<0.05)。
结论:1.通过“半量饮食+左旋肉碱+过度运动”方法可造成大鼠过度瘦身状态,使大鼠卵巢功能受损。2.造模4周,大鼠体重下降17%,大鼠动情周期明显紊乱,予以恢复饮食+左归丸干预后,体重及动情周期恢复较好;当造模8周,大鼠体重下降23%时,体重及动情周期恢复较差。3.造模4周,大鼠FSH、LH升高,E2下降明显;予以恢复饮食+左归丸干预后,有效下调FSH、LH水平,上调E2水平;当造模8周,各检测指标变化更明显。4.造模4周大鼠卵巢体积明显缩小,闭锁卵泡增加,颗粒细胞及黄体数量减少;予以恢复饮食+左归丸干预后可使受损大鼠卵巢组织恢复;造模8周,各卵泡变化更明显。5.造模4周,Bcl-2、VEGF蛋白表达明显下降,Bax蛋白表达明显升高;予以恢复饮食+左归丸干预后Bcl-2、VEGF蛋白表达增高,Bax蛋白表达下降;在造模4周后,Bcl-2/Bax、VEGF蛋白水平表达变化明显,在造模8周后,Bcl-2/Bax、VEGF蛋白水平表达不显著。