高产谷胱甘肽(GSH)酵母菌种的选育及发酵条件研究

来源 :华中科技大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:kkkdddz
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
本研究对谷胱甘肽高产菌株的选育及培养条件进行了探索。本文首先分析研究了还原型谷胱甘肽(Glutatione,GSH)的不同测定方法,并在前人研究的基础上对DTNB(5,5’-二硫代双-(2-硝基苯甲酸))法做了改进。改进后的DTNB法操作简单,精确度高,显色稳定,数据重现性好,并且不受半胱氨酸等含巯基物质的干扰。使用改进的DTNB法测定24株不同种属的酵母菌的生物量及胞内GSH含量,并从中选择了谷胱甘肽总量和含量都较高的啤酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)SC-20作为诱变出发菌株。对出发菌株使用氯化锌和氯化汞作为抗性筛选物进行等离子体射线和紫外线诱变,采用平板快速筛选方法进行筛选,并研究其传代稳定性,得到谷胱甘肽含量和胞内含量都较高而且稳定的变异菌株DU-20。该菌株摇瓶发酵谷胱甘肽产量为75.48 mg/L,较出发株提高118.40%;每克干细胞含谷胱甘肽7.90 mg,较出发株提高78.33%。菌株经10次传代培养,谷胱甘肽产量仅下降5.36%,确定此菌株是一株性状较稳定可深入开发研究的优良菌株。在摇瓶中对多培养基组成和培养条件进行了优化,以提高谷胱甘肽总量和胞内含量。研究了酵母对不同碳源和氮源的利用情况,确定合适的碳源为工业葡萄糖,有机氮源为酵母粉,无机氮源为乙酸铵,正交试验确定最佳浓度为葡萄糖2%,酵母粉0.6%,乙酸铵0.3%;考察了不同的无机盐的影响,正交实验确定最佳浓度为Na2HPO4 0.4%,KH2PO4 0.4%,MgSO4·7H2O 0.06%,CaC12·2H2O 0.02%;对摇瓶培养条件进行优化,确定培养基的pH自然,接种量为10%,摇瓶装液量为30 ml/250 ml,发酵时间为34 h。
其他文献
两型农业生产体系建设是一项复杂的系统工程,其不仅仅是一个农户、一个农场的经济活动,而且是一个组织化的系统过程。目前,我国两型农业生产体系建设的组织化系统已初具雏形,
自美国副总统戈尔于1998年1月31日提出“数字地球”之后,中国学者特别是地学界的专家充分认识到“数字地球”的战略地位,它将是推动我国信息化建设和社会经济、资源环境可持
<正>21世纪是信息时代,以"快"(信息更新快、传播快)为主要特点。人们拥有了手机、电脑等能便携工具,彼此成为互联网中的一环。在上海,许多学生拥有自己的电脑,几乎每位学生都
接力识别是一种操作简单并逐渐被广泛使用的离子识别方法。本文介绍了接力识别的意义和类型,详细地介绍了近年来包括金属离子和阴离子、阴离子和金属离子、金属离子和金属离
中华民族的优秀传统文化是有益于人类的文明成果,是长期积累的智慧结晶,是推动中国和世界发展的思想动力,更是我们建设和谐社会,开展班级德育工作的宝贵资源。现在,有的中学
仁义礼智信,为五常之道,在儒家看来,是常道,是亘古不变的法则,是儒家立身处世的核心原则。它对学生工作者具有一定的现实意义。学生工作者要有仁者之心,关爱学生,与学生和谐
随着我国经济的高速发展,人们物质生活水平不断提高,人们对环境的要求越来越高。不仅要求环境的多样和美观,而且对环境质量提出了更高的要求。城市园林绿化的发展不仅要满足
张爱玲的《传奇》创造的是现代都市生活中的"新传奇",所力图营造的是一种普通人平凡生活中的"奇异的感觉"。在直接体现这一"心理传奇"理念的叙事策略中,张爱玲将个体意义上的
黑龙江省是国家重要的商品粮基地,在节水增粮行动背景下,高效节水灌溉模式、装备类型及装备需求情况亟待解决.文中分析了全省节水增粮行动项目实施以来,其年度任务及完成情况