本试验主要进行卵巢卵母细胞的体外成熟、体外受精体系的完善,以及受精卵体外发育的研究,也以部分超数排卵的卵母细胞为对照比较研究。 从屠宰场收集卵巢,采用抽吸法、切剖法、刺破法采集卵母细胞。抽吸法得到的卵母细胞数最多,但花费时间最多且裸卵较多,不适合回收卵母细胞。切剖法平均每个卵巢回收的卵母细胞数为5.6枚,A、B、C级卵母细胞率分别为49%、43%、8%;刺破法平均每个卵巢回收的卵母细胞数分别为6.4枚,A、B、C级卵母细胞率分别为52%、42%、6%,差异不显著。但切剖法所用时间多于刺破法,两者差异显著(P<0.05)。 季节对回收卵巢卵母细胞有一定的影响。繁殖季节卵巢卵母细胞体外培养的成熟率显著高于非繁殖季节(P<0.05)。季节对超排效果好及效果一般的山羊在排卵点数和冲出的成熟卵母细胞数上差异不显著,但对未发情山羊的排卵点数和冲出的成熟卵母细胞数差异显著(P<0.05)。 本试验还比较了妊娠卵巢与未妊娠卵巢回收的可用卵母细胞数、体外培养成熟率,结果差异不显著。 卵巢上布满直径不同的卵泡,取自大卵泡、中等卵泡的卵母细胞培养成熟率分别为96.08%、68.06%,与小卵泡的45.90%相比差异极显著(P<0.01),大卵泡卵母细胞的成熟率也极显著高于中等卵泡(P<0.01),但中等卵泡卵母细胞体外培养成熟、体外受精后的卵裂率显著高于大卵泡卵母细胞与小卵泡卵母细胞(p<0.05)。 添加20ng/ml、30ng/ml、50ng/ml表皮生长因子(EGF)于卵母细胞培养液中,成熟率分别为:68.75%、74.19%、79.31%,卵裂率分别为43.64%、45.22%、53.91%,与对照组成熟率67.85%,卵裂率43.16%相比,20ng/ml EGF对卵母细胞的成熟与卵裂没有显著影响:30ng/ml EGF可显著促进卵母细胞的成熟(P<0.05),但卵裂率差异不显著;50ng/ml EGF可极显著促进卵母细胞的成熟(P<0.01),显著促进卵裂(P<0.05)。 在30μl、40μl、50μl的液滴中分别培养10枚受精卵,30μl液滴中受精卵的卵裂数稍高于40μl和50μl液滴中培养的受精卵卵裂数;在1枚/3μl、