宫颈癌(cervical cancer)是常见女性恶性肿瘤,其中人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)与90%以上宫颈癌发生相关。高危型HPV持续感染能高度活化宫颈上皮细胞中AKT,高度活化的AKT促进宫颈癌细胞的增殖和生存,最终诱导肿瘤的发生。异莲心碱是睡莲科植物莲的成熟种子中的胚芽中提取出来的一种双苄基异喹啉生物碱。研究发现异莲心碱具有显著的抗肿瘤活性。但是异莲心碱对宫颈癌细胞的抑制作用及作用机制并不明确。因此,阐明异莲心碱的抗宫颈癌细胞增殖作用及其作用的分子机制将为传统中药资源的开发提供新思路以及为宫颈癌的治疗提供新方向与理论指导。本研究采用CCK8测宫颈癌细胞(C33A、CaSki及SiHa)活力;流式细胞术检测宫颈癌细胞的周期分布;RT-PCR检测周期调控蛋白p21、p27、p15、CDK2、CDK4、Cyclin D、Cyclin E、GSK3α/β以及PTEN等蛋白的RNA水平表达情况;QRT-PCR定量分析周期调控蛋白p21、CDK2及Cyclin E的RNA水平的表达趋势;Western blot检测p21、CDK2、Cyclin E、AKT、p-AKT及GSK3α表达差异;计算机分子对接预测异莲心碱与AKT的相互作用。本研究发现异莲心碱剂量及时间依赖性的降低宫颈癌细胞系活性;剂量依赖性的将宫颈癌细胞周期组织在G0/G1期阻滞;剂量依赖性上调p21,下调CDK2和Cyclin E;剂量及时间依赖性下调p-AKT、GSK3α,但是对AKT总蛋白表达不影响。以AKT抑制剂AKTi-1/2为对照,分子对接显示异莲心碱与AKT有相互作用位点,并且,异莲心碱协同AKTi-1/2通过下调p-AKT、GSK3α和上调p21诱导宫颈癌细胞周期阻滞在G0/G1期。总的来说,异莲心碱通过抑制AKT的活化下调GSK3α、CDK2和Cyclin E,上调p21诱导宫颈癌细胞周期阻滞在G0/G1期。并且,AKT可能是异莲心碱的直接作用靶分子。因此,异莲心碱有望成为靶向AKT治疗宫颈癌的潜在药物,为宫颈癌的治疗提供新方向与科学依据。