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目的：阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease, AD)是老年人群常见的渐进性神经退行性疾病。临床及实验研究已确定3种导致早发家族性AD (FAD)的基因,即淀粉样前体蛋白(amyloid precursor protein, APP)、早老素-1(presenilin 1, PS-1)和早老素-2(presenilin 2, PS-2)。目前已有AD家系的基因突变数据大都来自国外,国内鲜有报道。为了解国内FAD的致病基因突变情况,本研究对部分中国人群中上述三个基因的突变热点进行检测分析；对于新发突变,进行初步的分子机制研究。方法：收集AD患者及其亲属的外周血样本,提取基因组DNA,针对PS-1和PS-2基因的编码外显子和APP外显子16、17设计引物,PCR扩增基因外显子后测序筛选相关基因突变。对于检测到的新发突变,采用Megaprimer-PCR法构建相应基因的cDNA突变体和真核表达质粒载体,经脂质体法转染HEK293细胞,G418筛选稳定表达细胞株；为在神经细胞中高效表达和研究FAD突变体的致病机理,本研究构建了重组腺病毒穿梭质粒,Pme I线性化后转化AdEasier(含有pAdEasy-1质粒的BJ5183)感受态细胞构建重组腺病毒质粒,经Pac I酶切乙醇沉淀后脂质体法转染HEK293细胞包装重组腺病毒,并用Western Blot进行鉴定。结果：AD临床样本致病基因的测序结果显示本研究筛选到一个PS-1基因的突变(R278I)和一个APP基因的新突变(K724X)。构建的APP695野生型及突变型真核表达质粒pcDNA3.1(-)-APP695WT、pcDNA3.1(-)-APP695K724X和pcDNA3.1 (-)-APP695K724N经过了菌液PCR和测序鉴定,获得了相应的HEK293稳定表达细胞株。构建的重组腺病毒质粒pAd-APP695WT、pAd-APP695K724X和pAd-APP695K724N,经过了菌液PCR和测序鉴定,Western Blot鉴定结果显示重组腺病毒包装成功。结论：本研究筛选到一个PS-1基因的突变(R278I)和一个新的导致FAD的APP基因突变(K724X)；构建了APP695相应的真核表达载体,建立了稳定表达HEK293细胞株；构建并成功包装了重组腺病毒,为深入研究FAD的发病机制和药物筛选奠定基础。