苦参(Sophora flavescensAit.)为我国传统中药，主要有效成份为生物碱。其中苦参碱和氧化苦参碱的药理活性最为广泛而显著，目前已经用于临床治疗乙型肝炎等。中药苦参生物碱的抗肿瘤作用近年来倍受青睐，因为它可以在治疗疾病的同时提高机体免疫力，使对身体的损伤减到最小。但在原料相对充足和产品需求量不断增大的情况下，原料药供应还是日趋紧张，制约其产量进一步提升的瓶颈是缺乏高效的产业化技术。因此，使苦参生物碱尽快形成大规模的生产能力是解决市场供不应求的根本措施。本研究首先对本课题组已建立的苦参生物碱薄层色谱分析方法进行准确度、精密度、稳定性等方面验证；然后研究苦参生物碱提取液上柱前的预处理方法，其中包括氧化态苦参生物碱的还原、提取液的碱沉净化，并确定最佳方案；之后利用大孔吸附树脂结合减压液相层析法（即真空液相色谱）进行苦参生物碱主要单碱的初步分离；最后用响应面法探索苦参碱结晶纯化条件，为实现工业化生产提供技术支持。具体研究内容如下：1、对目标物准确简便的检测是研究其分离纯化技术的前提。本研究利用实验室已建立的薄层展开体系，考查对苦参中四种主要生物碱的分离及检测效果。结果表明，该展开剂（乙酸乙酯:无水乙醇:氨水=5.2:0.7:0.6）的实用性强且稳定性好。2、由于研究选用了大孔吸附树脂对苦参生物碱进行分离纯化，故须对提取液进行上柱前的预处理。首先确定亚硫酸钠还原氧化态苦参碱的技术条件；接着分析不同pH下的碱沉除杂效果，确定pH13时，除去的杂质重量最大。最后对比研究了抽滤和离心两种非均相分离方法的优劣。3、在使用弱极性大孔吸附树脂AB-8吸附分离出苦参总生物碱的基础上，再运用减压液相层析梯度洗脱策略，尝试对苦参生物碱主要单体初步分离。4、用响应面法探索苦参碱结晶纯化条件，Box-Behnken试验设计建立了主要因素影响苦参碱结晶收率的二次多项数学模型，优化了内在因素水平，找到最佳值。当料液比为1:28.78，温度为59.19℃，时间为30min时，苦参碱的结晶收率最大，为97.16%。总之，本研究选用弱极性大孔吸附树脂，采用减压液相层析结合梯度洗脱策略，在一次柱过程中，不仅实现了苦参总生物碱与其他非生物碱类物质的高效分离，而且还可以对苦参生物碱主要单体实现初步分离。同时，该技术具有成本低、效率高、绿色环保等特性，这可为进一步的工业化技术开发提供参考。