小麦抗病抗逆相关基因的克隆和分析

来源 :中国农业科学院作物育种栽培研究所 中国农业科学院作物科学研究所 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zibu365H356
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根据抗病基因的保守域设计了3对引物,从普通小麦—簇毛麦6VS异代换系H1-2-8分离6VS端体,PCR扩增获得8类片段;以簇毛麦基因组DNA为模板扩增出12类片段。经巢式PCR和RFLP分析,来自6VS的8类克隆在抗、感病植株之间无差异;从簇毛麦基因组中得到了3个在抗、感植株之间存在差异的序列(RH42、RH55和RH66);从簇毛麦基因组中获得的RGA6具有NBS保守域,长度为504bp,与拟南芥抗病基因RPM1和RPP13、小麦抗病基因LRR19以及番茄抗病基因I2C-l有较高的同源性。 以RGA6为探针,筛选用抗白粉病小麦—簇毛麦易位系Pm97034构建的cDNA文库,得到了4个阳性克隆。R3-2-2与动植物的亚硫酸氧化酶(sulfite oxidase,SO)有60~90%的同源性,长度为647bp,编码140个氨基酸,具有开放阅读框并含有保守域Moco-dimer。R6-2-2与真核生物的VDAC(voltage-dependent anion chennel)蛋白有20~40%的同源性,长度为1047bp,编码279aa,是一个不完整的开放阅读框,预测结构具有Euk-porin结构域。R8-1-1与植物中已经克隆的过氧化氢酶有80~90%的同源性,长度为1810bp,编码493aa,具有完整的开放阅读框和过氧化氢氧化酶保守域。R9-1-1与动植物的POZ(pox virus and zinc finger protein)蛋白有30~70%的同源性,长度为1446bp,具有开放阅读框和BTB/POZ保守域。R3-2-2与R9-1-1是首次从小麦中克隆到的具有SO和POZ保守域的cDNA序列。R8-1-1具有完整的开放阅读框,与玉米Cat-3基因具有81%同源性,预测R8-1-1可能具有与Cat-3类似的功能,可为转基因小麦抗逆育种提供新的基因。
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