扁桃体伴腺样体肥大的非肥胖患儿肠道微生物菌群初步分析

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目的:测定扁桃体伴腺样体肥大患儿及非扁桃体伴腺样体肥大儿童肠道菌群丰富度、均匀度及群落结构分布情况,同时测定两组儿童血肝功能指标的水平。探讨扁桃体伴腺样体肥大及因此带来的儿童睡眠呼吸障碍(pediatric sleep disordered breathing,PSDB)是否会改变肠道菌群的结构,为PSDB及其并发症的诊疗提供新的思路。方法:实验组纳入2020年5月至2021年11月就诊于安徽医科大学第一附属医院耳鼻咽喉头颈外科的47例扁桃体肥大伴有腺样体肥大的非肥胖儿童,获得其睡眠临床量表的得分(sleep clinical score,SCS),评估其睡眠呼吸障碍的严重程度,SCS均大于等于6.5分,可临床诊断为“PSDB”。同时将同期就诊于我科的16例非扁桃体伴腺样体肥大的儿童(SCS<6.5分)作为对照组。入院后收集所有受试者的粪便标本及空腹血标本(未经任何治疗时)。利用16S r RNA测序技术,对所有受试者的肠道菌群分别从OTU分布、α多样性、β多样性、组间差异显著性、门水平细菌相对丰度、肠道菌群功能预测等方面进行分析。同时测定空腹血中各肝功能相关指标。运用SPSS 22.0、Graph Pad Prism 8.0等对两组的基本信息数据、肝功能指标及微生物多样性进行分析。结果:1.两组儿童的临床基本信息如年龄、性别、BMI等无统计学差异,实验组的SCS明显高于对照组(P<0.05)。两组的肝功能指标均处于正常参考范围,实验组的白蛋白、白/球比例明显低于对照组(P<0.05),球蛋白、谷草转氨酶、谷丙转氨酶显著高于对照组(P<0.05),总蛋白、碱性磷酸酶、γ-谷氨酰转移酶等在两组间无显著差异(P>0.05)。2.实验组的肠道微生物的OTU数目及α多样性明显高于对照组(P<0.05),β多样性两组之间存在统计学差异。由此可以得出:实验组的肠道微生物的丰富度、均匀度均高于对照组,且两组的微生物群落构成存在显著差异。3.构成人体微生物的优势菌门的变化为:实验组的拟杆菌门的相对丰度显著低于对照组(FDR矫正的P值<0.001),且拟杆菌门的相对丰度与SCS明显负相关;实验组变形菌门相对丰度明显高于对照组(FDR-P<0.001),且变形菌门的相对丰度与SCS明显正相关;厚壁菌门及放线菌门,经检验两组间差异无统计学意义(厚壁菌门P=0.506;放线菌门P=0.912)。4.根据16s r RNA测序结果,应用PICRUSt软件预测两组差异菌群的基因功能,将预测的基因功能或代谢通路同COG数据库和KEGG同源值进行比对,得出扁桃体伴腺样体肥大患儿肠道菌群介导的生物过程。结论:1.扁桃体伴腺样体肥大与肠道微生物的丰富度、均匀度及群落组成结构等的变化存在关联,拟杆菌门的相对丰度与SCS显著负相关,变形菌门的相对丰度与SCS显著正相关,提示儿童扁桃体伴腺样体肥大改变了肠道菌群且肠道微生物群可能参与了PSDB的发生及发展。2.扁桃体伴腺样体肥大患儿球蛋白、谷草转氨酶、谷丙转氨酶这三项指标明显高于对照组,白蛋白、白/球比例这两项指标明显低于对照组,提示扁桃体伴腺样体肥大患儿存在潜在肝损,而肠道微生物群是否为连接PSDB与非酒精性脂肪性肝病的机制之一有待进一步研究。3.扁桃体伴腺样体肥大患儿肠道微生物群落的变化对于全面理解PSDB及相关终末疾病的机制有一定意义,且为PSDB治疗和预后推断提供了新的思路及理论基础。
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