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目的：
内毒素血症引发的全身性炎症反应,造成广泛血管内皮细胞损伤,这是导致脏器微循环和功能障碍的主要病理基础。研究发现严重感染时出现的急性中枢神经系统功能障碍与血脑屏障的破坏存在密切关系。丹参素(DihydroxylphenylLactic Acid,DLA)是丹参的有效成分之一,以往的研究证实了丹参素DLA能够改善内毒素导致的肠微循环障碍,但对内毒素造成的血脑屏障破坏是否具有保护作用尚不清楚。因此,本研究旨在应用活体可视显微镜系统观察内毒素血症时大鼠血脑屏障的改变,及DLA对其的干预作用,和可能作用机制。
材料和方法：
雄性SD大鼠经股静脉持续输注脂多糖(5mg/kg/h)90分钟,DLA(5mg/kg/h)在脂多糖输注前及输注后经另一条股静脉持续给予。利用活体可视显微镜系统观察大鼠软脑膜,记录细静脉血管直径,细静脉粘附白细胞数量,细静脉白蛋白渗出和红细胞流速的动态变化。在90分钟观察结束后,进行脑干/湿比和伊文思蓝(Evansblue,EB)含量测定。用western-blot法测定MMP-9,水通道蛋白4(aquaporin4,AQP4),occludin,claudin-5,ZO-1、caveolin-1蛋白含量；并利用透射电镜观察大鼠脑皮质血管及紧密连接的变化。
结果：
1.在LPS输注后,大鼠软脑膜细静脉的白蛋白渗出明显增加,粘附于壁上的白细胞数显著增加,细静脉血流速低于正常对照,脑组织水含量及EB含量升高。DLA前给药、后给药可以明显抑制白蛋白渗出、白细胞粘附、血流速下降；并使脑组织水含量及EB含量下降。
2.DLA可抑制LPS造成的ZO-1和claudin-5的下降,以及MMP-9、和caveolin-1的升高,起到保护作用。同时电镜观察发现DLA能够减少LPS导致的紧密连接开放,并减轻胶质细胞终足水肿。
3.LPS能够造成软脑膜、室管膜及脑血管周围胶质细胞终足上AQP4表达增加,而DLA可使脑血管周围胶质细胞终足上AQP4表达下降,但软脑膜与室管膜处AQP4表达无明显变化。可能与AQP4介导水肿液清除有关。
结论：
1.经静脉持续输注LPS可以造成软脑膜微循环改变,使其通透性升高,血流速度降低、白细胞粘附增加。
2.DLA对LPS造成的软脑膜微循环障碍有保护作用；
3.DLA的作用机理可能与其稳定紧密连接、保护脑血管基底膜、减少内皮细胞质膜微囊有关,并且DLA可能有促进水肿液清除作用。