骨髓间充质干细胞促进肾脏缺血再灌注损伤修复的实验研究

来源 :苏州大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jeffery2010
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目的:急性肾功能衰竭(Acute renal failure, ARF)是临床常见之危重症,死亡率较高,目前治疗方面仍缺乏有效的手段。缺血再灌注损伤引起的急性肾小管坏死是ARF的常见病因,其病理特征为肾小管梗阻、肾小管滤过液回漏和滤过功能障碍。因此促进肾小管上皮的再生和肾小管结构的重建是治疗ARF的关键。本实验应用缺血再灌注肾脏匀浆和全反式维甲酸对大鼠的骨髓间充质干细胞(mesenchyml stem cells, MSCs)进行诱导,探讨体外诱导MSCs向肾小管上皮样细胞分化的可能性;同时对缺血再灌注肾脏损伤的大鼠行MSCs静脉移植治疗,观察MSCs在大鼠体内的分布情况以及对肾脏修复的促进作用。方法: 1.体外实验:采用梯度离心和贴壁筛选法分离纯化MSCs,取第三代的MSCs进行诱导。在MSCs的培养液中加入全反式维甲酸,终浓度为5μM;同时将装有缺血再灌注损伤大鼠肾脏匀浆的插入式嵌合培养皿置于MSCs的培养板中,以此对MSCs进行诱导,分别于0d、3d、5d、7d时对诱导的MSCs细胞进行大体形态学观察、超微结构观察、细胞组织化学染色、胞浆内第18型角蛋白(CK18)流式细胞仪测定。
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