大青叶中4(3H)喹唑酮体外抗甲1型流感病毒和PRRS病毒的研究

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4(3H)喹唑酮是大青叶的抗病毒有效成分之一,药理实验证明具有抗病毒、抗肿瘤、抗高血脂以及抗炎等作用。本文分别进行了4(3H)喹唑酮体外抗甲1型流感病毒和PRRS病毒的作用研究。体外抑制甲1型流感病毒的试验主要通过建立病毒感染模型,探讨4(3H)喹唑酮对甲1型流感病毒体外增殖抑制的可能机制。试验采用细胞病变观察法和MTT法,测定五个不同浓度(320、160、80、40、20μg/mL)的4(3H)喹唑酮经三种不同加药方式对用甲1型流感病毒处理的MDCK细胞的保护作用,以及通过4(3H)喹唑酮对甲1型流感病毒在细胞中增殖的影响实验和4(3H)喹唑酮体外抗甲1型流感病毒作用的时效关系实验,来评价4(3H)喹唑酮体外对甲1型流感病毒的作用效果。试验结果表明:甲1型流感病毒的TCID50为10-4.90/0.1 mL;4(3H)喹唑酮体外对MDCK细胞的最大无毒浓度为320μg/mL;最大无毒浓度范围内,4(3H)喹唑酮体外对甲1型流感病毒直接灭活作用不明显,与达菲药物对照组相比统计学差异显著(P<0.05);对甲1型流感病毒感染细胞的阻断作用和对已进入细胞的甲1型流感病毒的抑制作用明显,与达菲药物对照组相比统计学差异不显著(P>0.05),且抗病毒效果与药物浓度(20μg/mL -320μg/mL)呈剂量依赖关系;不同浓度的4(3H)喹唑酮均能使甲1型流感病毒的TCID50降低,最大可使TCID50由4.9最低到2.95(下降近2个数量级);4(3H)喹唑酮在不同时间抗流感病毒呈现出不同的时效关系,但72h的作用效果最好。此外,为探讨4(3H)喹唑酮是否具有抗PRRS病毒的作用,对4(3H)喹唑酮体外抑制PRRS病毒的活性进行研究,从而为新型抗病毒药物的开发提供理论依据。实验采用与上述实验相同的分组方法、给药方式及检测方法,测定4(3H)喹唑酮对感染PRRS病毒的Marc-145细胞的保护作用。结果表明:PRRS病毒的TCID50为10-5.63/0.1 mL;4(3H)喹唑酮体外对Marc-145细胞的最大无毒浓度为80μg/mL;最大无毒浓度范围内,4(3H)喹唑酮体外直接灭活PRRS病毒、以及对病毒的阻断和抑制作用均不明显,与拉米夫定药物对照组相比统计学差异都显著(P<0.05)。上述实验结果显示:4(3H)喹唑酮在72h内具有很好的体外阻止甲1型流感病毒吸附到靶细胞和抑制甲1型流感病毒增殖的作用,但是对PRRS病毒的作用不明显。因此,本试验为临床治疗流感和蓝耳病药物的研发提供了实验依据,也为尽快找到大青叶的确切药效物质基础,实现该药材和制剂的有效评价有一定的意义。
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