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爬山虎叶斑病是爬山虎中为害较为严重的病害之一,其病害不仅严重影响了爬山虎的生长,也影响城市园林垂直绿化和交通通道护坡的经济价值。本论文对采集自河南省洛阳市栾川县龙峪湾爬山虎叶斑病叶,进行常规组织分离纯化,结合形态学和 PCR分子鉴定,鉴定出引起该种病害的病原菌,为进一步认识该病害,以及该病害预防及综合治理提供更多的理论依据。主要结论如下: 通过对该病危害症状观察,该病主要为害爬山虎的叶片,初期发病时有褐色的小点,然后逐渐扩大为圆形、近圆形或不规则形的黄褐色病斑,边缘组织有明显的深褐色凸起,病斑中央散生分生孢子盘的黑色小点,发病后期病斑连接成一片,病斑中央易穿孔,严重时造成大量落叶。高温高湿的环境下易发病。通过柯赫氏法则进行分离纯化,并对病原菌培养菌落形状及在光学显微镜下对分生孢子梗和分生孢子形态进行观察。病菌分生孢子纺锤形,顶细胞生2~4根不分枝的无色附属丝,中间有2~3个淡褐色的细胞,具有3~4个隔膜,基细胞偏生或中间生一根无色的附属丝。初步鉴定出该病原菌为数丝顶多毛孢(Bartalinia robillardoides Tassi)。进一步通过 PCR对 rDNA-ITS区段(ITS1、ITS2)扩增、测序,在GenBank中进行Blast搜索和比对分析。根据rDNA-ITS序列分析结果确定所分离的病原菌为半知菌中的数丝顶多毛孢。为进一步验证其致病性,我们对该病原菌进行了反接验证,发现接种所分离的数丝顶多毛孢可导致与接种病原菌一致的发病症状,进一步验证了我们所分离的病原菌为B. robillardoides。这是首次明确报道数丝顶多毛孢可引起植物叶部病害。 对数丝顶多毛孢的生物学特性进行了初步研究。测定了在不同温度、不同pH值、不同光照、不同碳氮源的条件下对数丝顶多毛孢生长和产孢量的影响,为爬山虎病原菌研究提供理论依据。结果显示,温度会促进病原菌的生长,其能正常生长的温度范围为15~35℃,而在25℃条件下生长最旺盛、产孢量最大,菌丝以及分生孢子的致死温度为60℃,10 min。病菌在 pH值为4~11范围内均能生长,pH值为6-7时生长最好。在不同光照和不同碳氮源条件下均能生长,其中光暗交替条件下生长量最大,菌落直径为5.68 cm。多种碳氮源均能被病原菌利用,最佳碳源为蔗糖、葡萄糖,最佳氮源为硝酸钾和硝酸钙,其中病原菌在氮源为硝酸钾的培养基中产孢量最多,高达5.13×107个/mL。病菌在没有氮源的培养基上病菌不能生长。