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诺如病毒是一类无包膜的正义RNA病毒,具有高度感染性,能够感染各年龄段人群,造成呕吐、低烧和急性肠炎,对于免疫缺陷的病人来说,甚至可能造成生命危险。在全球范围内,大约18%的急性肠炎是由诺如病毒引起的。诺如病毒也成为了食品传播性疾病的首要病因,对各个国家,尤其是发展中国家造成了巨大经济损失,也给人类健康带来威胁。诺如病毒的基因组由三个开放阅读框构成,ORF1编码6个病毒所需的非结构蛋白,ORF2和ORF3分别编码病毒的衣壳蛋白VP1和VP2。其中,ORF1编码的6个非结构蛋白对病毒的生活周期至关重要,之前已有大量的研究证明。比如VPg蛋白能作为蛋白引物起始诺如病毒的复制,NS6负责将ORF1翻译的多聚蛋白切割成6个成熟蛋白,而NS7则是RNA依赖的RNA复合酶,负责合成诺如病毒的RNA基因组。尽管如此,诺如病毒的非结构蛋白中仍然有许多没有被深入研究,比如诺如病毒NS3蛋白。对RNA病毒来说,它们的基因组RNA被严密的调控,从而使它们能顺利地完成复制和翻译等多种功能。另外,病毒基因组的RNA也需要形成正确的构象来行使功能。这就需要RNA重塑蛋白——RNA解旋酶或RNA分子伴侣的参与。通过氨基酸序列分析我们发现,诺如病毒NS3具有解旋酶家族SF3的保守基序,因此很有可能具有解旋酶活性。因此,我们利用杆状病毒表达系统表达了MBP标签的NS3蛋白,并开展了一系列实验研究它的生化活性。我们的研究发现,诺如病毒NS3具有NTP酶活性和解旋酶活性,在存在NTP和Mg2+的情况下,能够从5’ →3’或者3’ →5’的方向解开双链RNA以及RNA-DNA杂合链。另外,我们也发现了 NS3具有不依赖于NTP的分子伴侣活性,能在体外打开发卡RNA结构并促进它们的退火。通过体外实验我们发现NS3对RdRP依赖的诺如病毒复制的确有促进作用,这也凸显了其在诺如病毒的生活周期中发挥的重要作用。此外,我们发现盐酸胍对NS3的NTP酶活性和解旋酶活性都有一定的抑制作用,并且在细胞内能够抑制诺如病毒复制子的复制。这些结果表明诺如病毒的NS3也许能够作为药物的靶点,而盐酸胍可以作为一种潜在的诺如病毒治疗药物。我们的研究第一次确定了诺如病毒NS3的解旋酶活性和分子伴侣活性,并发现了一种潜在的药物用以治疗诺如病毒感染,既有理论价值,又有实际意义。