骨形态发生蛋白-2对大鼠完全脱位牙延迟再植的影响

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目的:本试验采用动物实验的方法,探讨骨形态发生蛋白-2(BMP-2)对大鼠牙脱位后延迟再植牙周膜愈合的影响。方法:选取河北医科大学动物实验中心提供的口腔卫生良好,无龋齿及牙周炎,体重250-300g,雄性Wistar大鼠作为实验对象,共32只。将32只雄性大鼠完全随机分成四组:A组(阴性对照组)、B组(阳性对照组)、C组(BMP-2组)、D组(BMP-2+Bio-oss骨粉组),每组8只。将其常规定量喂养,术前12h禁食水。准确称量动物体重,用10%水合氯(3ml/kg)腹腔注射麻醉,仰卧固定,无菌拔除右上中切牙。A组:不做任何处理,即刻再植;B组、C组、D组:将脱位牙搁置在经高温高压消毒的金属托盘内自然干燥1h,体外行倒立即根充,玻璃离子根尖封闭(这些操作在5min内完成),B组根尖封闭后立即再植。牙根处理:C组8颗牙牙根表面直接涂抹BMP-2糊剂;D组8颗牙牙根表面涂抹BMP-2+Bio-oss骨粉糊剂。牙槽窝处理:脱位牙再植前,用5ml生理盐水冲洗牙槽窝。C组牙槽窝内涂布BMP-2糊剂,D组牙槽窝内涂布BMP-2+Bio-oss骨粉糊剂。将处理后的C组、D组牙齿再植入牙槽窝。术后7d内动物进半流食,术后无任何异常活动,进食正常。术后8周以过量水合氯醛深度麻醉处死动物,切取包括右上中切牙在内的骨块,用生理盐水冲洗,10%福尔马林固定,pH6.9的10%EDTA脱钙4周,石蜡包埋,沿与牙体长轴垂直的方向切片,伊红-苏木精染色。组织学观察,在盖玻片上画“米”字形八等份线条,将此盖玻片覆盖在已做封闭处理的组织片上,光学显微镜观察。盖玻片上“米”字形线条与牙根平面有8个交点,此即为每张切片的观察记录点。参考Andreasen的方法,牙再植的愈合可分为3种类型,(1)牙骨质愈合(CH):包括牙周膜愈合以及牙骨质无缺损而牙周膜被增生的牙槽骨所替代(简称牙周膜骨替代)两种情况;2)牙根替代性吸收(RR);3)牙根炎症性吸收(IR)。记录每个观察点所属愈合类型,分类计数。分别计算出每组每颗牙三种愈合方式的平均百分比,比较各组间每种愈合方式百分比有无差别。采用Kruskal-Wallis Test检验,对四组数据愈合百分比进行总体分析,用Mann-Whitney U法进行组间两两比较,以上数据分析均采SPSS13.0统计软件完成,检验水准取双侧α=0.05,P≤0.05有统计学意义。结果:1HE染色的切片结果:A组(阴性对照组)再植后牙周膜纤维再附着较好,牙根表面无炎症性吸收和骨性粘连;B组(阳性对照组)再植后牙根表面存在大面积炎症性吸收,吸收区有骨形成;C组(BMP-2组)再植后牙骨质表面有吸收,牙周膜被增生的牙骨质、牙槽骨替代,少量牙周膜再附着和炎细胞浸润;D组(BMP-2+Bio-oss骨粉组)再植后牙体硬组织相对完整,牙周膜间隙被增生牙骨质、牙槽骨替代,形成牙骨质愈合,牙根表面部分区域亦可见牙周膜纤维再附着和少量吸收。2根据牙再植后愈合方式不同,计算出各组各种愈合百分比。牙骨质愈合(CH)各组的平均百分比为:A-CH (93.404±2.580)%、B-CH(18.013±2.983)%、C-CH(18.633±4.752)%、D-CH(21.160±6.123)%;牙根替代性(RR)各组的平均百分比为:A-RR(6.424±4.272)%、B-RR(65.580±4.962)%、C-RR(68.476±4.123)%、D-RR(68.900±4.370)%;牙根炎症性吸收各组平均百分比为:A-IR (0.173±0.489)、B-IR(16.408±4.675)%、C-IR(12.891±7.306)%、D-IR(9.941±8.188)%;分别用Kruskal-Wallis Test检验各种愈合百分比,P均小于0.05,有统计学意义,可认为各组的愈合方式不完全相同。用Mann-Whitney U法进行组间两两比较,A组与其他各组P<0.05,有统计学意义,即刻再植愈后最好;其他各组P均大于0.05。结论:1牙脱位后即刻再植预后最好,能达到理想的牙骨质愈合。2BMP-2与Bio-oss骨粉联合或单独使用可在一定程度上有利于牙骨质愈合,抑制炎症性吸收。但是无统计学意义,所以尚不能认为其能抑制脱位牙延迟再植牙根吸收。
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