Cyr61和碱性成纤维生长因子在子宫肌瘤中的表达研究

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目的:通过探讨Cyr61和碱性成纤维生长因子(bFGF)在子宫肌瘤组织中和子宫肌层组织中的表达,及bFGF和Cyr61之间的相关性。探讨二者与子宫肌瘤的发生和发展的关系,为明确子宫肌瘤的病因学提供一定的科学依据:为预防、控制和应用新型方法治疗子宫肌瘤的发生和发展提供一定的理论依据。方法:(1)体外原代培养人子宫平滑肌瘤细胞和周围正常子宫肌层细胞,免疫细胞化学法(SABC法)进行鉴定;(2)实验用肌瘤细胞和肌层细胞各随机分为三组:A组:检测Cyr61mRNA的表达:B组:检测bFGFmRNA的表达;C组:bFGF干预后不同时间点Cyr61的表达水平,分为7组:Oh组、0.5h组、1h组、2h组、4h组、8h组、24h组。(3)采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测细胞中Cyr61mRNA和bFGF mRNA的表达。结果:(1)成功培养了人子宫平滑肌瘤细胞和正常子宫肌层细胞,培养的细胞经免疫细胞化学检测肌动蛋白,证实90%以上的细胞为平滑肌细胞,符合要求。(2)Cyr61mRNA在子宫肌瘤细胞和邻近正常子宫肌层组织中均有表达,且在邻近正常子宫肌细胞中的表达水平(0.2821±0.0212)远远高于在子宫肌瘤细胞中的表达水平(0.0810±0.0080),差异有显著性(P<0.001):在肌瘤和肌层细胞中,Cyr61mRNA在月经周期中分泌期和增生期的表达无显著差异(P>0.05)。(3)bFGFmRNA在子宫肌瘤细胞和邻近正常子宫肌细胞中均有表达,其在子宫肌瘤细胞中的表达水平(1.2204±0.0321高于在邻近正常子宫肌细胞中的表达水平(1.1250±0.0483),差异有统计学意义(P<0.05)。(4)用10ng/ml bFGF干预后,在不同时间点,正常子宫肌细胞中Cyr61 mRNA的表达量是有变化的,0.5-2.0h内,Cyr61mRNA的量有明显的增长,在1.0h时刻达到高峰(0.8137±0.0181),但之后就开始回落。七个时间点两两比较,0.5h、1h和2h与各组相比,差异均有显著性(P<0.001),其余各时间点相互比较,无显著差异(P>0.05)。然而在子宫肌瘤细胞中,bFGF干预后不同时间点Cyr61mRNA的表达量无明显变化,七个时间点两两比较,均无显著差异(P>0.05)。结论:(1)Cyr61mRNA在子宫肌瘤细胞和子宫肌层细胞中均有表达,其在子宫肌层细胞中的表达远远高于在子宫肌瘤细胞中的表达。(2)子宫肌瘤及肌层组织中均有bFGFmRNA的表达,且在肌瘤组织中有较高表达。(3)在正常子宫肌细胞中bFGF试剂对Cyr61mRNA具有上调作用,但在子宫肌瘤细胞中bFGF试剂却不能诱导Cyr61mRNA的表达。
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