背景与目的:IL17-A是IL17家族(包括IL-17A, IL-17B, IL-17C, IL-17D, IL-17E和IL-17F)的成员,作为Th17细胞亚型因主要分泌的蛋白分子近年来受到广泛关注。Th17细胞与同属于CD4T淋巴细胞的Th1、Th2亚型在刺激条件和转录因子等方面有显著不同。在类风湿性关节炎(RA)、系统性红斑狼疮(SLE)、银屑病等病患中发现IL17-A表达升高,但并不清楚IL17-A在疾病发病过程中的具体作用。因此,制备经济有效的IL17-A以及抗hIL-17单克隆抗体(mAb)为今后相关实验研究具有重要意义。方法及结果:克隆并原核表达hIL-17蛋白,以之为免疫原免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞和小鼠骨髓瘤NS-1细胞融合。通过间接ELISA法筛选可特异性分泌抗hIL-17 mAb的杂交瘤细胞。采用Ig类与亚类鉴定试剂盒鉴定mAb的Ig亚类;通过ELISA、Western blot、免疫组织化学染色法鉴定mAb的特异性。获得7株可稳定分泌抗hIL17-A mAb的杂交瘤细胞,其分泌的mAb六株为IgM,一株为IgG2a。Western blot分析表明,此mAb所识别的靶分子的相对分子质量(Mr)约为15400。免疫组织化学染色表明,mAb与食管癌、胃癌反应呈阳性。结论:成功地制备IL17-A以及抗hIL-17 mAb,为今后相关实验研究奠定了基础。