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目的:通过动物实验研究,探讨VaD大鼠海马CA1区神经元形态损害与脑缺血缺氧后局部炎症反应的相关性,研究VaD发生的形态学损害的机制;检测不同干预治疗后VaD大鼠海马CA1区炎症因子的表达,明确头针运动疗法对VaD大鼠海马CA1区各炎症因子的影响,探讨该疗法保护神经元、改善认知的作用机制。方法:选取健康SD大鼠,采用Olsson法建造VaD大鼠模型,运用水迷宫行为学实验检测造模效果,然后将造模成功的VaD大鼠随机分为4组,分别是模型组、运动训练组、头针丛刺组和头针运动针刺组,每组8只。假手术组8只,仅暴露颈总动脉而未进行双侧颈总动脉夹闭。共5组大鼠进行最后的实验研究。分组完成后按照分组进行相应的治疗,假手术组和模型组只进行正常的饲养,不进行额外治疗;运动训练组给予运动康复训练治疗;头针丛刺组采用于氏头针七区划分法,取顶区、顶前区及额区(即神庭穴、百会穴、前顶穴及这三穴左、右侧各旁开5 mm),给予皮内针针刺;头针运动针刺组采用运动训练结合头针丛刺的联合治疗。治疗时间为4周。治疗后进行Morris水迷宫试验,前五天进行定位航行实验,第六天在撤掉大鼠逃生用的平台后进行空间探索实验,通过Morris水迷宫实验来观察各种治疗方法对VaD大鼠认知学习能力的影响。在治疗结束后,一部分大鼠断头取脑并剥离海马组织,通过RT-PCR方法检测各组实验大鼠海马区促炎因子IL-6、IL-17、IL-1β、TNF-α和抑炎因子IL-10、TGF-β等基因mRNA相关表达量。一部分大鼠灌注后取脑,通过HE染色观察海马CA1区组织形态学变化。结果:(1)定位航行实验:与假手术组相比,模型组及各治疗组治疗前逃避潜伏时间升高(P<0.05);治疗后,与模型组相比,各治疗组的逃避潜伏时间均降低(P<0.05),其中头针运动针刺组最显著,差别具有统计学意义(P<0.05)。(2)空间探索实验:与假手术组相比,模型组及各治疗组治疗前首次到达逃生平台的时间明显增加(P<0.05),穿过平台的次数和平台停留时间均明显降低(P<0.05);与模型组相比,各治疗组治疗后首次到达逃生平台的时间明显降低(P<0.05),穿过平台的次数和平台停留时间均明显增加(P<0.05),其中头针运动针刺组最显著,差别具有统计学意义(P<0.05)。(3)RT-PCR检测相关炎性因子:与假手术组相比,模型组大鼠海马区炎性因子IL-6、IL-17、IL-1β、TNF-α基因mRNA相对表达量明显升高;治疗后,与模型组相比,各治疗组相关蛋白相对表达量均下降(P<0.05),其中头针运动针刺组最显著,差别具有统计学意义(P<0.05)。(4)RT-PCR检测相关抗炎因子:与假手术组相比,模型组大鼠海马区抗炎因子IL-10、TGF-β基因mRNA相对表达量结果无明显变化(P>0.05);治疗后,与模型组比较,各治疗组相关蛋白相对表达量均上升(P<0.05),其中头针运动针刺组最显著,差别具有统计学意义(P<0.05)。(5)海马区炎症因子与逃避潜伏期相关性分析:相关炎性因子基因mRNA相对表达量与逃避潜伏期呈正相关,结果具有统计学意义(P<0.05);相关抗炎因子基因mRNA相对表达量与逃避潜伏期呈负相关,结果具有统计学意义(P<0.05)。(6)HE染色:假手术组大鼠海马CA1区组织结构完整清晰,细胞排列规则有序,形态正常,轮廓清晰,核仁可清晰辨认;模型组大鼠海马CA1区组织细胞排列模糊且混乱,正常细胞数减少,可看到坏死的神经元,细胞可看到明显水肿,部分核仁固缩、深染不可见。运动训练组、头针丛刺组与头针运动针刺组大鼠脑CA1区与模型组相比,细胞形态相对规则,轮廓相对清晰,正常细胞数量增多,细胞间质水肿较模型组减轻,坏死神经元减少,核仁较清晰。其中头针运动针刺组结构最优。结论:1.运动训练法和头针丛刺法均可以显著提升VaD模型大鼠的学习记忆能力和空间探索能力,也可以改善VaD模型大鼠海马组织的病理形态,但是两者结合的治疗效果更为显著。2.海马组织炎性因子的异常分泌可能是VaD发病机制之一。VaD大鼠海马区IL-6、IL-17、IL-1β、TNF-α等炎性因子基因mRNA水平明显上升,经过头针运动针刺法治疗后,炎性因子IL-6、IL-17、IL-1β、TNF-α水平较前降低,抗炎因子IL-10、TGF-β水平较前升高,VaD大鼠的认知学习能力也得到极大地改善。提示头针运动针刺法干预可调节海马区炎性因子水平,改善VaD大鼠认知能力。