黑沙蒿提取物对粘虫的生物活性及有效成分的初步分离

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本研究以菊科植物黒沙蒿为试验材料,采用多种有机溶剂和不同提取方法对黒沙蒿地上部进行提取,用提取物及其萃取物对危害禾本科的重要害虫——粘虫进行了生物活性测定,同时对黒沙蒿乙酸乙酯提取物中的活性物质进行了初步分离。试验结果如下:1.以粘虫为试虫,对黒沙蒿等16种植物材料的丙酮提取物进行了室内生物活性筛选,结果发现处理后48h拒食率达到50%以上的有10种植物,浸虫法处理72h后校正死亡率达到50%的有7种植物,黒沙蒿提取物的拒食和触杀活性较高,拒食率和校正死亡率分别为97.83%和80%。2.选用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正已烷和丙酮等5种不同极性有机溶剂,采用温浸法、索氏法和冷浸法对黒沙蒿地上部进行提取得到15种提取物:3种方法提取以索氏法的产出率最高,乙酸乙酯为溶剂的产出率为17.97%,温浸法次之,为11.41%,冷浸法产出率最低,为5.92%;就所使用的溶剂而言,乙酸乙酯的产出率最高,其次为丙酮、氯仿、正己烷、石油醚。3.对黒沙蒿的15种提取物进行生物活性测定,结果表明:15种提取物均对粘虫表现出了一定的生物活性,不同提取物的活性存在显著差异,索氏法的乙酸乙酯提取物活性最突出,其主要作用方式为拒食,触杀和生长发育抑制作用,而胃毒作用相对较低。在拒食试验中,24h内拒食中浓度为8.4mg/ml;触杀活性较显著,浸虫法测定72h的校正死亡率达89.29%;有较强的生长发育抑制作用,1d后的生长发育抑制率为91.78%,2d后是86.32%,平均蛹重169.1mg,最终化蛹率为43.33%,且生长发育速度较对照延迟。4.黒沙蒿乙酸乙酯提取物经液——液萃取,以石油醚萃取物的萃取率最高,其次是氯仿、乙酸乙酯、正丁醇、水萃取物。5种萃取物采用叶碟法和浸虫法进行生物活性测定,以石油醚萃取物的生物活性最强,处理24h后拒食率为91.84%,72h粘虫的死亡率达到86.67%;其次为氯仿萃取物,处理24h后拒食率为77.05%;72h死亡率为63.33%。5.石油醚萃取物经柱层析分离后,利用TLC法检验,合并相同成分,得到13个流分,采用叶碟法进行生物活性测定,发现拒食活性成分主要集中在流分L3、L4 L5、中,拒食率均在89%以上,其中流分L4对粘虫的效果最好,经TLC检测,发现L4有2个成分,且流分L3只有1个成分。因此推测,活性物质主要是Rf值为0.56的成分,为最终确定有效成分作了前期工作。根据试验结果,本文就植物材料有效成分的提取、黒沙蒿提取物杀虫生物活性、活性物质的分离、需要解决的问题及应用前景等进行了讨论。
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