富血小板纤维蛋白对人牙龈成纤维细胞释放炎性细胞因子的影响

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研究背景:PRF具有促进细胞分化和增殖的功能。在临床应用中,PRF能很好的促进成骨,如在即刻种植中单纯应用PRF辅助上颌窦提升,术后的影像学随访发现有较好的骨密度和骨增量。动物实验亦发现PRF可显著促进骨缺损处新骨的形成。其促进成骨的机制可能是由于其增加了细胞外信号调节激酶(ERK)的磷酸化,促进核转录因子κB(NF-κB)的活化及骨保护素(OPG)的表达,增强了碱性磷酸酶(ALP)的活性。在PRF微观结构的研究中发现,PRF是由纤维蛋白组成的立体三维网状结构,血小板、白细胞高密度的网络于该三维结构中。有研究发现,PRF集中了离心血液中大约97%的血小板、大于50%的白细胞,并且在邻近红细胞层的几个毫米中,血小板和纤维蛋白形成更为粗大的簇状凝集物。PRF制备中不需添加抗凝剂,其中高密度的血小板会自然激活,血小板中的α-颗粒释放多种生长因子。PRF中的大量白细胞可以高浓度释放促炎因子IL-1β、IL-6、TNF-α及抗炎因子IL-4、VEGF,因此有学者猜测其具有维持免疫平衡的作用。研究目的:观察PRF是否影响人牙龈成纤维细胞分泌炎性细胞因子。研究方法:原代培养牙龈成纤维细胞,形态学、免疫细胞化学染色鉴定成功后,首先预实验确定合适的Pg-LPS浓度和PRF大小,而后用合适浓度的Pg-LPS诱导第4代牙龈成纤维细胞释放炎性细胞因子IL-6、TNF-α、MCP-1。采用ELISA、免疫细胞化学染色的方法,观察PRF是否影响牙龈成纤维细胞释放炎性细胞因子。研究结果:Pg-LPS终浓度为0.1ug/ml的DMEM培养基能够成功诱导HGF释放炎性细胞因子;3ml血液离心所得PRF的1/4比较适合在24孔板中与HGF共同培养;PRF自身释放大量细胞因子;PRF能够部分中和Pg-LPS的诱导作用;PRF参与HGF的免疫反应。研究结论:1、PRF自身释放大量细胞因子,包括促炎因子IL-6、TNF-α、MCP-1。2、PRF能够明显的抑制Pg-LPS对HGF的诱导作用。3、PRF能够与HGF相互作用,参与了HGF的免疫反应。
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