锦绣龙虾生物学和人工繁殖技术的研究

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锦绣龙虾(Panulirus ornatus)是我国大型名贵虾类,经济价值高,市场供不应求,由于过度捕捞,资源已十分有限,为了更好地利用和保护这一重要水产资源,本课题开展了龙虾属分子系统学、锦绣龙虾解剖学与组织学、生长、胚胎发育和幼体发育等生物学研究和人工繁殖的研究,并取得下列结果。   通过对我国龙虾属8种龙虾的线粒体COI序列分析表明,龙虾COI片段大小为673—681bp,其中(C+G)%含量较低,为40.2%~44.5%。龙虾种内的变异较小,遗传距离范围0.00~0.057,平均0.016,种间遗传距离较大,在0.124~0.228之间,平均0.185。分子系统研究表明,形态上把这8种龙虾分成同一属是合适的,与分子系统的结果一致。NJ树和IMP树都支持我国的8种龙虾分成2支:日本龙虾、长足龙虾和密毛龙虾为一支,中国龙虾、杂色龙虾、黄斑龙虾、锦绣龙虾和波纹龙虾等5种龙虾为另一支。初步推断COI序列可以作为DNA条形码进行龙虾属内种间的分类。   锦绣龙虾的消化系统主要包括消化管和消化腺,消化道包括食道、胃、中肠和后肠。消化管的基本结构由内向外可分为四层,即粘膜层、粘膜下层、肌肉层和外膜。粘膜层主要由单层柱状上皮和基膜构成,除中肠外其余消化管管壁上皮均覆盖有几丁质膜,粘膜下层和外膜均为结缔组织层,结缔组织中分布有食道腺。消化腺主要是肝胰腺,由肝小管组成,根据其形态和功能的不同,可把构成肝小管的单层细胞分为四类:分泌细胞、吸收细胞、纤维细胞和胚细胞。   锦绣龙虾的呼吸器官是鳃,共有28对,其中侧鳃10对,关节鳃5对,足鳃6对和肢鳃7对。为丝状鳃,由鳃轴和鳃丝构成,鳃轴直接发出多条鳃丝,鳃轴和鳃丝上都有入鳃血管和出鳃血管。   锦绣龙虾的循环系统由心脏、血管、血窦、血液等组成。心脏有三对心孔,背面2对,腹面1对,从心脏发出7条主动脉,前大动脉一条,触角动脉一对,肝动脉一对,胸动脉一条和背腹动脉一条。胸动脉到达腹部后分成前后2支,上行支称胸上动脉,下行支称腹下动脉。各动脉还有小的分支到达各器官、组织。   锦绣龙虾的神经系统包括脑神经节,围食道神经,食道下神经节,胸部神经链和腹部神经索组成。脑神经节向前发出第一、二触角神经、视神经和头部皮肤神经各一对,向后发出一对围食道神经。食道下神经节发出6对神经,分别是大颚、2对小颚和3对颚足。胸部神经链有5个神经节,并由此发出5条神经到分别5对步足,在第三到第四步足间分离出一个神经孔,是胸动脉穿过的地方。   锦绣龙虾雌性生殖系统包括卵巢、输卵管和生殖孔。卵巢呈“H”形,左右两叶相连相通,前伸到胃前端,后伸到第一腹节。其组织结构由卵巢壁、结缔组织、生殖上皮、滤泡细胞和卵细胞组成。输卵管从卵巢的下叶三分之一处发出,穿过肌肉到达第三步足底节上的生殖孔,输卵管的结构从内到外由上皮、基膜及结缔组织组成。雄性生殖系统包括成对的精巢,输精管和生殖孔组成。精巢主要由生精小管和收集管组成,生精小管之间有结缔组织和血管等,同一生精小管内有不同发育期的精细胞。输精管按大小不同分为三段,它们的组织结构相同,管壁从外至内依次由外膜、平滑肌细胞层、基膜及假复层柱状腺上皮细胞层所构成,有发达的纵肌突。   锦绣龙虾的胚胎发育期分为卵裂期、囊胚期、原肠期、膜内无节幼体期、七对附肢期、九对附肢期,十一对附肢期、复眼色素形成期和准备孵化期,在水温29℃,经22—23天孵化出膜。由人工培育获得的叶状幼体,通过形态观察,描述了各期叶状幼体的形态特征,并对各期幼体进行分类。与长足龙虾相比,锦绣龙虾叶状幼体较小,变态较慢,它与波纹龙虾早期叶状幼体发育相似。   通过对60~80尾不同生长时期锦绣龙虾月生长指标的测定,推算出一些有意义的生态参数,建立了生长模型。锦绣龙虾的体长(L)-体重(W)的相关式:W=0.0348L3.0663;体长(L)和头胸甲长(CL)的相关式:L=2.7722CL+0.3379得出锦绣龙虾的体长生长方程:Lt=37.498×(1-e-0.07677(t-0.05584)),体重生长方程:Wt=2333.24×(1-e-0.07677(t-0.05584))3.0663,体长生长速度方程:d1/dt=2.8798×e-0.07677(t-0.05584),体重生长速度方程:dW/dt=549.2443×e-0.07677(t-0.05584)(1-e-0.07677(t-0.05584)2.0663。计算出其拐点年龄(Tr=ln3/k+t0)为14.65个月。说明锦绣龙虾体长在前期生长较快,而后期生长缓慢;体重前期生长较慢,后期较快,体重增长速度曲线呈不对称的S曲线,并具拐点,在拐点处其体重增长速度能达到最大值:79.24g/月。由此推算19个月锦绣龙虾可生长到1032.16克。   用网箱中养殖2年以上的锦绣龙虾进行人工繁殖的研究,结果表明,切除龙虾单侧眼柄可促进龙虾的性腺发育;龙虾繁殖2次,第一次平均产卵量为40.51×104粒,平均孵化率为78.25%,平均每尾龙虾孵化出叶状幼体数量为31.70×104尾;第二次繁殖平均产卵量为32.51×104粒,孵化率为78.08%,平均每尾龙虾孵化出叶状幼体25.38×104尾。   在小水体(容积0.5m3)和大池培育(容积20 m3)中培育锦绣龙虾叶状幼体,结果发现,卤虫无节幼体是龙虾叶状幼体的最佳饵料,经过69-75天的培育,叶状幼体变态到第Ⅵ期,共获得叶状幼体696尾(其中小水体75尾,大池621尾),50尾存活90天,6尾存活100天。
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