论文部分内容阅读
目的:探讨加味桃仁承气汤对内毒素致伤大鼠凝血及肺脏功能损伤预防及治疗作用,探讨其药物作用机制,为临床应用提供可靠的实验依据。方法:1.建立Wistar大鼠内毒素DIC模型及实验分组:(1)正常对照组:Wistar大鼠10只,每只生理盐水3-4ml灌胃,1次/8h。(2)非干预组(DIC模型组):Wistar大鼠各时间点10只,每只腹腔注射内毒素10mg/kg,同时立即给予生理盐水3-4ml灌胃,1次/6h。(3)加味桃仁承气汤干预组:Wistar大鼠各时间点10只,每只腹腔注射内毒素10mg/kg,此前0.5h给予中药3-4ml,1次/6h,共3次。(4)肝素干预(肝素组):此前0.5h给予生理盐水3-4ml灌胃,皮下注射低分子肝素750u/kg,1次/日。(5)中药肝素组:Wistar大鼠25只,每只腹腔注射内毒素10mg/kg,此前0.5h给予中药3-4ml,并皮下注射低分子肝素750u/kg,1次/日。检测指标:各组观察24h大鼠存活率;2h,4h,8h观察时间点检测:①凝血常规指标及分子指标包括:凝血酶原时间(PT)、激活的部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、纤维蛋白原(Fib)、D二聚体、活化蛋白C(APC)、抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ,AT)。②血细胞分析,包括血小板、白细胞、红细胞计数。2.内毒素休克造模与实验分组(1)正常对照组:Wistar大鼠,腹腔注入等量生理盐水。注入等量生理盐水前0.5h生理盐水3-4ml灌胃,6h 1次。(2)模型组:Wistar大鼠每只腹腔注射内毒素10mg/kg,此前0.5h给予生理盐水3-4ml灌胃,6h 1次。(3)中药干预组:Wistar大鼠,每只腹腔注射内毒素10mg/kg,注入内毒素前0.5h给予中药3-4ml,相当于生药20g/kg灌胃,6h 1次。检测指标:平均动脉压,血浆TNF-α、血浆核因子-κB,活性,抗凝血酶及蛋白C活性。3.内毒素急性肺损伤造模与实验分组成年雄性Wistar大鼠,随机分为3组:正常(生理盐水)对照组、内毒素急性肺损伤模型组、加味桃仁承气汤组。加味桃仁承气汤组大鼠腹腔注射单剂LPS10 mg/kg,之前半小时给予加味桃仁承气汤灌胃3—4ml,6h1次;内毒素急性肺损伤动物模型组:大鼠腹腔注射单剂大肠杆菌内毒素(LPS) (10 mg/kg),之前半小时给予生理盐水3—4ml灌胃,6h1次正常对照组:大鼠腹腔注射等体积的生理盐水,之前半小时给予生理盐水3—4ml灌胃,6h1次。注射内毒素之后自由进食水。观察指标:大鼠一般状态,肺组织病理形态变化,肺湿干比(W/D),支气管肺泡灌洗蛋白及中性粒细胞检查,大鼠动脉血气分析,肺组织中NF-κB相对含量测定,血浆抗凝血酶及蛋白C活性。结果1.实验组大鼠于注射内毒素后45min陆续开始出现眼睛微闭,活动减少,精神萎靡,反应迟钝,毛色干枯,光泽较差,拱背蜷卧,竖毛,寒战,呼吸急促,口周发绀。24h大鼠死亡率70%;肝素组与模型组之间大鼠行为表现似乎无明显差异,24h时死亡率50%,与模型组比较差异显著(p<0.05);中药及中药加肝素组上述反应程度较模型组轻,2组症状体征持续时间短约4h后明显好转,中药组及中药+肝素组之间无明显差异;中药组死亡率30%,中药+肝素组24h死亡率20%。模型组与肝素组之间的死亡率明显差异(p<0.05),中药组与中药+肝素组之间的死亡率无明显差异(p>0.05),中药组与肝素及模型组比较差异显著(p<0.05)。2.各组大鼠注射内毒素后均出现白细胞、血小板计数的减少,Fib降低,PT及APTT延长,AT及PC活性降低,肝素组与模型组比较Fib降低,PT及APTT延长明显改善(p<0.01);中药组白细胞、血小板计数的减少、Fib降低、PT及APTT延长、AT及PC活性降低较模型组显著改善,血小板计数的减少、Fib降低、PT及APTT延长改善与肝素组比较无差异(p>0.01),白细胞计数的减少、AT及PC活性降低改善好于肝素组(p<0.01),与中药肝素组比较各项指标无差异(p>0.01)。3.大鼠注射内毒素后平均动脉血压不断下降,6小时降到最低,8小时略有回复;加味桃仁承气汤组大鼠血压也有下降,但下降幅度缩小,2组比较具有显著差异(p<0.01)。4.加味桃仁承气汤组外周血单个核细胞NF—κB活性及TNF-α分泌明显少于模型组(p<0.01)。5.加味桃仁承气汤组肺病理改变及肺功能改变明显好于内毒素模型组,肺组织NF—κB活化同时较模型组降低(p<0.01)。结论:1.加味桃仁承气汤可以有效的防治内毒素引起的大鼠DIC,其效果不亚于低分子肝素2.加味桃仁承气汤可以有效的减轻内毒素引起的大鼠休克。3.加味桃仁承气汤可以减轻内毒素所致大鼠急肺损伤。4.加味桃仁承气汤上述作用的机制可能与其提高内毒素致伤大鼠血浆抗凝血酶及蛋白C活性,抑制NF—κB活化,减少TNF-α分泌有关。