恩诺沙星在养殖水环境中的归趋以及对微生物群落结构影响

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恩诺沙星(Enrofloxacin,ENR)是第三代喹诺酮类抗菌药物,又名乙基环丙沙星。恩诺沙星现已广泛应用于各种动物感染性疾病的预防和治疗,近来年在水生动物疾病的防治中得到越来越广泛的应用。随着集约化养殖日益发展,高密度的养殖模式使得恩诺沙星等抗菌药使用量剧增,导致水环境不断蓄积残留的抗菌药,导致养殖水环境的恶化。而对于恩诺沙星在水生生物中的代谢规律较多,而在模拟养殖条件下在水环境中的归趋研究则较少,本研究则揭示了养殖下药饵给药后恩诺沙星在异育银鲫(Carassius auratus gibelio)、水体和底泥中的代谢和分布规律,对水环境中微生物群落结构的影响,以及在底泥中的降解规律,为抗生素在水生生态中的归趋的研究以及水产生态养殖技术提供理论依据和支持。研究结果如下:1.模拟养殖系统药饵给药后恩诺沙星在异育银鲫体内、水体和底泥中的代谢和分布在模拟池塘水产养殖系统中,恩诺沙星以18 mg/kg剂量药饵投喂异育银鲫,每天两次、给药周期6d,研究恩诺沙星在异育银鲫体内吸收、分布、代谢和消除规律,以及在水体和底泥中分布规律。结果表明:异育银鲫体内各组织中的药物在72h从快速下降变为缓慢下降的趋势,异育银鲫组织中恩诺沙星峰浓度(Cmax)依次为肠道>肾>肌肉>鳃>肝脏>血浆,分别为14.15 mg·kg-1、13.31 mg·kg-1、14.15mg·kg-1、7.48 mg·kg-1、7.94 mg/kg和2.94mg·L-1;各组织中均可检测到代谢产物环丙沙星,其峰浓度与恩诺沙星峰浓度的百分比分别为5.10%、1.70%、6.28%、2.97%、2.90%和6.53%;组织中恩诺沙星清除率(CLz)顺序为血浆>肝脏>肠>鳃>肌肉>肾。随着给药次数增多,水体中恩诺沙星残留浓度快速升高,在最后一次给药后6 h达到峰值(为5.23μg·L-1),随后开始下降,但水体中一直未检测到代谢产物环丙沙星;底泥中恩诺沙星首先呈现上升趋势,在240 h达到峰值(为796μg·kg-1),后略有下降,480 h时降至587μg·kg-1;底泥中环丙沙星残留呈现逐渐上升趋势,在480h残留量为382μg·kg-1;底泥中代谢产物环丙沙星残留浓度与恩诺沙星浓度的百分比在27.5%~65.1%之间。药饵给药后药物残留主要存在于养殖生态系统的底泥中,底泥中药物残留百分比为41.86%-46.69%,且消除较慢,药饵投喂后残留在底泥中的药物生态安全风险应引起重视。2.恩诺沙星对养殖水环境中微生物群落结构的影响通过在池塘原生态位以隔离水件为一个小生态环境,通过多次给药不同浓度的恩诺沙星,研究了不同浓度的恩诺沙星对水环境中水质和微生物群落结构的影响。结果表明高浓度的恩诺沙星(20μg/L)有助于水体中氨氮、硝氮和亚硝氮的积累,且会减少水中厚壁菌门(Firmicutes)的相对丰度,增加放线菌门(Actinobacteriota)、变形菌门(Planctomycetota)和蓝细菌门(Cyanobacteria)的相对丰度,会降低水体中微小杆菌属(Exiguobacterium)的相对丰度低浓度恩诺沙星(2μg/L)短期会抑制厚壁菌门的相对丰度,但长期却会有促进效果。底泥中相对丰度占比最高的是变形菌门。高浓度的恩诺沙星(20μg/L)会减少底泥中的微生物多样性,会减少变形菌门相对丰度,增加放线菌门相对丰度,会增加大理石雕菌属(Marmoricola)的相对丰度。3.底泥中真菌和细菌对恩诺沙星降解的影响通过以不同浓度细菌抑制剂布罗波尔和真菌抑制剂放线菌酮的添加,研究了底泥中真菌和细菌对恩诺沙星降解的影响,以及对环丙沙星生成的影响。结果表明底泥中恩诺沙星的降解主要是细菌在发挥作用,且抑制剂布罗波尔的量越高,恩诺沙星降解越慢。布罗波尔的添加也显著影响了底泥中环丙沙星的生成,且浓度越高,抑制效果越好。而放线菌酮的添加对恩诺沙星的降解以及环丙沙星的生成并无显著影响,这说明了底泥中的真菌对恩诺沙星的降解影响并不大。实验中CCIP/ENR在10%左右,小于前面实验中的近50%,可能是温度和底泥含水量的差异对微生物功能和活性的影响导致。
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