肝细胞生长因子及其联合吡柔比星对肝癌细胞的增殖和凋亡的影响

来源 :第四军医大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:stonecxx
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目的:本研究旨在明确肝细胞生长因子(HGF)是否对肝癌细胞株HepG2有生长抑制作用及其可能机制以及HGF能否诱导肝癌细胞发生凋亡;探讨HGF与吡柔比星(Pirarubicin或Theprubiein,THP)在体外联合应用对肝癌细胞是否有协同治疗作用;探讨HGF在肝细胞癌治疗中的应用价值,为今后进一步研究提供可行性和相应的理论依据。方法:以人肝癌细胞株HepG2为研究对象,采用MTT比色试验法,检测不同HGF浓度和作用时间对肝癌细胞生长增殖的影响;免疫细胞化学染色检测细胞增殖核抗原(PCNA)的表达;应用DNA荧光染料Hoechst 33258对肝癌细胞核染色,荧光显微镜下观察凋亡细胞形态并计算凋亡指数和采用流式细胞术(FCM)检测HGF作用后肝癌细胞凋亡率的变化;采用FCM检测HGF对肝癌细胞生长周期和RT-PCR技术,检测HGF对肝癌细胞p16基因表达的影响,结果:1:MTT比色试验显示HGF对人肝癌细胞HepG2活性有显著的抑制作用,并且呈现时间和剂量的依赖性,随药物浓度加大和作用时间延长,存活细胞数量逐渐减少。2:HGF对HepG2细胞的增殖活性具有抑制作用,药物作用4d后细胞PCNA的表达显著降低。3:Hoechst染色实验及流式细胞术结果显示HGF可诱导HepG2细胞凋亡。与对照组比较,实验组细胞凋亡指数(AI)和凋亡率(AR)明显增加(对照组分别为(8.53±0.75)%,(10.86+3.38)%,而10ng/mL、50ng/mL
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