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黄花蒿(ArtemisiaannuaL.)在传统医药中具有清热解毒、抗疟等功效,在我国资源丰富,目前工业上对黄花蒿的利用仅限于青蒿素的生产。本工作以黄花蒿为原料,对其所含绿原酸类成份的鉴定、纯化及转化进行了研究。(1)建立了黄花蒿中绿原酸类物质分析的高效液相色谱-质谱方法。以流动相A:0.05%乙酸水,流动相B:乙腈,梯度洗脱,可使其中的36种绿原酸类物质峰在45 min内分离。这些成份中的15种是首次从黄花蒿中鉴定(包括单咖啡酰奎尼酸2种、二咖啡酰奎尼酸5种、阿魏酰奎尼酸1种、咖啡酰阿魏酰奎尼酸2种、咖啡酰二甲氧肉桂酰奎尼酸3种、二甲氧肉桂酰奎尼酸1种和肉桂酰奎尼酸1种)。特别是其中的1,5-二咖啡酰奎尼酸是我国用化学合成法生产的抗HIV新药IBE-5的成分,可以作为分离此药的新来源。(2)对黄花蒿中的总咖啡酰奎尼酸进行提取。考察溶剂种类、浓度、时间及料液比等因素的适宜提取条件为:70%乙醇,1.5 h,料液比1:20。不同产地的黄花蒿中总咖啡酰奎尼酸含量介于0.4%-5.8%之间,1,5-二咖啡酰奎尼酸的最高量为 2.0%。(3)对黄花蒿工业剩余物中单咖啡酰奎尼酸和二咖啡酰奎尼酸进行分离纯化。静态吸附时,聚酰胺对二咖啡酰奎尼酸的吸附率为89.4%,解析率为99.5%,吸附容量为16.98 mg/g,说明聚酰胺适宜分离黄花蒿中二咖啡酰奎尼酸。初次纯化后二咖啡酰奎尼酸的纯度为45.7%,收率66.8%。用SephadexLH-20凝胶对聚酰胺分离的二咖啡酰奎尼酸进行二次纯化后,二咖啡酰奎尼酸纯度达到85.7%,收率 53.4%。(4)用棘孢曲霉和黑曲霉对绿原酸类物质进行转化。棘孢曲霉固体发酵浸提酶液在0.5h内对黄花蒿提取液中绿原酸类物质进行特异性转化的产物为4-咖啡酰奎尼酸、4-阿魏酰奎尼酸和3-咖啡酰奎尼酸,三种成份的含量增加率分别为121.3%、50.4%和47.3%。3,5-二咖啡酰奎尼酸和4,5-二咖啡酰奎尼酸转化率分别为44.2%和96.6%,体系中87.9%的1,5-二咖啡酰奎尼酸保留在转化液中。棘孢曲霉液体酶液在0.5 h内水解5-咖啡酰奎尼酸生成咖啡酸的转化率为100%。黑曲霉液体酶液的转化产物为4-咖啡酰奎尼酸、4-阿魏酰奎尼酸和3-咖啡酰奎尼酸,转化液中三种成份的含量增加率分别为131.4%、32.6%和22.3%。其中1,5-二咖啡酰奎尼酸、3,5-二咖啡酰奎尼酸和4,5-二咖啡酰奎尼酸的转化率分别为16.1%、42.8%和25.3%。此转化可用于制备单咖啡酰奎尼酸单体。