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猪链球菌2型（Streptococcus suis serotype 2，SS2）是我国猪链球菌病的重要病原，不仅可引起猪脑膜炎、关节炎、心内膜炎、败血症、肺炎和突然死亡，还可感染相关人员并致死，是一种重要的人畜共患病病原。在SS2中，可区分为强毒株、弱毒株和无毒株，已发现的毒力因子主要包括溶菌酶释放蛋白（MRP）、胞外蛋白因子（EF）、溶血素（SLY）、New ORF2、荚膜多糖（CPS）、纤维蛋白原结合蛋白（FBP）、谷氨酸脱氢酶（GDH）、分泌型核酸（SSnA）和三磷酸甘油醛脱氢酶（GAPDH）等。在orf2和mrp之间存在一个新的开放阅读框，本课题组通过活性染色已证实该阅读框具有次黄嘌呤核苷酸脱氢酶（IMPDH）活性，通过Interpro和PHD软件分析IMPDH的结构域模型为[LIVMT]-[RK]-[LIVM]-G-[LIVM]-G-X-G-[SRK]-[LIVMAT]-C-X-T，其中半胱氨酸残基（C）为底物IMP的结合部位。且已证实IMPDH基因的融合表达蛋白可延长HEp-2细胞的S期。1．猪链球菌2型次黄嘌呤核苷酸脱氢酶基因的分片段缺失与表达该阅读框共有957bp个碱基，编码319个氨基酸，未发现一个半胱氨酸残基（C）。通过软件分析功能结构域存在于第9-798bp基因片段所编码的蛋白质中，对这789bp个碱基，每次缺失大约200bp以找其酶的催化部位和底物结合部位。按照正确的阅读顺序自行设计八对引物，引物两端分别添加限制性酶切位点EcoRⅠ、XhDⅠ或NcoⅠ及保护性碱基，且相应的片段通过EcoRⅠ酶切位点去串联。并克隆至pET-32α（+）载体中共构建五个重组质粒，转化至大肠杆菌BL21中，表达出分子量分别为45.3kDa，43.8kDa，42.6kDa，43.3kDa的四个缺失蛋白和一个分子量为52.2kDa的全长蛋白。2．猪链球菌2型IMPDH基因功能结构域的确定猪链球菌2型IMPDH基因的分片段缺失克隆和表达，共原核表达出五个融合蛋白。表达的五个重组蛋白都含有6个连续的组氨酸残基，利用能与Ni2+结合的特性，进行纯化。五个重组蛋白经Ni-NTA His·Bind Resin进行非变性条件纯化后，获得相应的蛋白。免疫转印这4种缺失蛋白可被SS2的抗血清识别，具有免疫原性，且和IMPDH的一株单抗具有不同程度的免疫反应性。全长基因含有IMP dehydrogenase功能结构域，可催化IMP生成XMP，五个重组蛋白通过IMPDH活性染色，确定该酶的催化部位和底物结合部位存在于第627-790bp位碱基编码的蛋白需序列中。这五个蛋白分别作用于HEp-2细胞，流式细胞仪检测表明它们可不同程度地影响HEp-2的细胞周期。