不同频率张应变下体外培养猪颈总动脉的蛋白组学研究

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血液动力学(hemodynamics)因素在血管重建(remodeling)中起着重要作用。正常人体血管所受到的周期性张应变主要包括频率、幅度和持续时间3个重要参数。周期性张应变加载幅度和时间对血管重建的影响已有不少报道,但频率对动脉血管重建的影响尚不清楚。本文采用血管体外应力培养系统,取巴马小型猪的颈总动脉分别在0.5 Hz(低频率组)和1.25 Hz(正常频率组)频率的周期性脉动张应变条件下,培养24 h,控制平均流量为50 ml/min,平均压力为120 mmHg。然后,应用双向凝胶电泳结合质谱和生物信息学分析的比较蛋白质组学方法,比较不同频率作用下颈总动脉蛋白表达的差异。结果表明,(1)应用双向电泳图谱分析,共发现有2倍以上差异表达(表达上调或下调)的蛋白点有67个,其中有49个点在1.25 Hz组中表达丰度比0.5 Hz组高,有18个点在0.5 Hz组中表达丰度比1.25 Hz组高;(2)质谱分析得到17个蛋白点的PMF图谱,搜索NCBI非冗余库,获得9个较为可靠的蛋白点身份: Crystallin、GRP 78、KIAA0098蛋白在0.5 Hz组高表达,HSP27、triosephosphate isomerase 1、alpha-actin、FOX1、ATP synthase D chain、procollagen-proline 2-oxoglutarate 4-dioxygenase在1.25 Hz组高表达;(3)体外培养细胞牵拉实验对HSP27磷酸化蛋白表达的验证表明,在不同频率张应变作用下HSP27的磷酸化水平变化与血管体外应力培养的结果一致,1.25 Hz频率应力加载促进了血管HSP27蛋白表达。
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