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抗癌药物5-氟尿嘧啶((5-fluoro-2,4(1H,3H)pyrimidinedione ,5-FU)是结直肠癌患者普遍使用的化疗药物之一。5-Fu应用于不同的患者,其毒性及疗效均不同,尤其是毒性个体差异较大,甚至出现致死性的腹泻、骨髓抑制。随着结直肠癌的药物基因组学迅速发展,对5-FU及其衍生物代谢及药理作用关键酶系基因多态性分布进行研究。特别是通过对5-FU及其衍生物代谢及药理作用关键酶系基因多态性分布在大结直肠癌人群中的研究,寻找出能够指导临床用药物的基因多态性位点,寻找出能够指导临床化疗的敏感位点,通过推广用于临床,为5-Fu个体化用药提供依据。二氢嘧啶脱氢酶(Dihydropyrimidine dehydrogenase ,DPD)是是5-Fu分解代谢和清除的限速酶, DPD活性降低或缺乏时,5-Fu的系统清除率降低。在此状态下用5-Fu治疗,可引发严重的毒性反应;酶活性越低,毒性反应程度愈高。研究发现其药理学基础是--二氢嘧啶脱氢酶基因(Dihydropyrimidine dehydrogenase gene ,DPYD)遗传缺失的不同。基因组DNA中某一特定核苷酸位置上发生转换、颠换、插入或缺失等变化,而且任何一种等位基因在群体中的频率不小于1%。这种DNA序列多态性称之为单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNP)。药物基因组学发现SNP可以影响药物的有效性和毒性,所以研究SNP与药物差异反应的相关性成为SNP研究的重要内容之一。我们采用Taqman MGB探针法测定二氢嘧啶脱氢酶基因SNP分析其与5-FU化疗毒副作用的相关性,为结直肠癌5-FU的个体化治疗提供科学依据。目的:本研究采用Taqman MGB探针法测定二氢嘧啶脱氢酶基因SNP,分析其与结直肠癌患者5-FU化疗毒副作用的相关性,为结直肠癌5-FU的个体化治疗提供科学依据。方法:采用60份结直肠癌患者的外周EDTA抗凝静脉血,利用大连宝生物公司Blood Genome DNA Extraction Kit提取基因组DNA,利用美国ABI公司Taqman MGB探针进行实时荧光定量PCR进行扩增反应,并测定二氢嘧啶脱氢酶基因的14G1A、G2194A、T85C、G1156T、T464A等位点的单核苷酸多态性。评价患者二氢嘧啶脱氢酶基因单核苷酸多态性与5-FU毒副作用的相关性。结果:(1)二氢嘧啶脱氢酶基因SNP:60例患者中未检测到14G1A、G1156T多态性位点变异;T85C多态性位点中,发现突变型2例(3.3%),杂合型8例(13.3%),野生型50例(83.4%)。G2194A多态性位点中,有杂合型6例(10.0%),野生型54例(90.0%),未见变异型;T464A多态性位点中,有杂合型2例(3.3%),野生型58例(96.7%) ,未见变异型; (2) T85C多态性位点副作用发生率从高到低依次均为突变型、杂合型和野生型,差异有统计学意义(P<0.05);T464A、G2194A杂合型副作用发生率高于野生型,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:结合文献报道和本实验结果,目前国内结直肠癌患者尚未检测到二氢嘧啶脱氢酶14G1A、G1156T多态性位点变异,尚不能应用它们指导个体化治疗;检测到G2194A、T464A、T85C多态性位点中,有杂合型,野生型和变异型突变;且毒副作用发生率从高到低依次均为突变型、杂合型和野生型。可取上述位点指导应用5-FU个体化治疗。二氢嘧啶脱氢酶基因单核苷酸多态性检测对预测5-FU化疗的毒副反应有一定的指导意义,为结直肠癌5-FU的个体化治疗提供了理论依据。