放线菌C-411b和C13发酵液抑菌活性研究

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本文以放线菌C-411b和C13为材料,分别从菌株的分类鉴定、抑菌活性、活性成分的分离鉴定等方面进行了系统研究。主要研究结果如下:(1)基于培养特征,生理生化特征及16S rDNA序列分析结果,将放线菌C-411b鉴定为Streptomyces rishiriensis C-411b;将放线菌C13鉴定为Streptomyces albolongus C13。(2)室内生测结果显示,C-411b发酵液对枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)和猕猴桃溃疡病菌(Pseudomonas syingae)均有较强的抑制活性,抑菌圈直径分别为22mm、18mm和17mm;对油菜菌核病菌(Sclerotinia sclerotiorum)、番茄灰霉病菌(Botrytis cinerea)、核果炭疽病菌(Drupe colletotrichum gloeosporioiles)和苹果炭疽菌(Colletotrichum gloesporioides)的菌丝具有强烈抑制作用,抑制率分别为95%、95%、85%、85%。对于小麦白粉病(Blumeria graminis)没有明显的保护作用。C13发酵液,对于猕猴桃溃疡(Pseudomonas syingae)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)和蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)强烈抑制作用,抑菌圈直径分别为25mm、15mm和17mm。对供试的病原真菌抑菌活性一般,且没有选择性,其抑制率均为50%。对于小麦白粉病(Blumeria graminis)亦不具有保护作用。(3)采用活性追踪,经过HPD大孔树脂吸附、硅胶柱层析及反相HPLC制备等方法,从C-411b发酵液中分离出一个活性化合物Za-1,经ESI-MS,NMR等波谱技术鉴定为聚醚类抗生素ionophore X-206。从C13发酵液中分离出三个活性物质C13-1、C13-2、C13-3,经ESI-MS,NMR等波谱技术,化合物C13-1、C13-2、C13-3分别被鉴定为SF2738F、SF2738D、SF2738B。(4)抑菌活性结果表明,化合物Za-1对枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、和猕猴桃溃疡病菌(Pseudomonas syingae)有强烈的抑制作用,其MIC值分别为0.78和6.25μg/mL。载药量1μg/片时,除对小麦赤霉病菌(Fusarium graminearum)菌丝生长无抑制作用外,对烟草赤星病菌(Alternaria alternate)、苹果炭疽菌(Colletotrichum gloesporioides)、油菜菌核病菌(Sclerotinia sclerotiorum)均有不同程度的抑制作用,其抑制率分别为77.56%、88.99%、73.18%。化合物C13-1对大肠埃氏菌(Escherichia coil)和金黄色葡萄球菌(Staphylococcus au-reus)有强烈的抑制作用,其MIC值分别为0.3125和0.625μg/mL。化合物C13-2对猕猴桃溃疡病菌(Pseudomonas syingae)和白菜软腐病菌(Riwinia carotovora)的抑制效果较好,其MIC值均为10μg/mL。化合物C13-3对猕猴桃溃疡病菌(Pseudomonas syingae)有强烈抑制作用,其MIC值为2.5μg/mL。化合物C13-1~C13-3在供试浓度下,对供试的病原真菌孢子萌发没有明显的抑制作用。
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