雷帕霉素是从亲水链霉菌中分离的一种大环内酯类抗生素,是一种有效的抗真菌剂,也是一种很好的免疫抑制剂同时具有抗肿瘤作用。 本文首先开展了雷帕霉素产生菌的菌种选育工作,通过紫外(UV)诱变、亚硝基胍(NTG)诱变和硫酸二乙酯(DES)诱变,筛选到了高产的诱变菌株,其中最高产量达到420mg/L,接近世界先进水平。 然后论文在已进行系统优化过的原始菌株的培养条件及培养基基础上,研究了诱变得到的雷帕霉素高产菌NS3-824的摇瓶发酵培养基,探讨如何进一步提高其生产雷帕霉素的能力。通过系统的发酵培养基优化,诱变菌株生产雷帕霉素的能力能够得到明显的提高,在优化后的条件下产量提高了19%。 基于之前大量的诱变育种工作和原生质体融合育种,我们从中选择出若干高产菌株进行全基因组重排实验,并初步探索了种间原生质体融合的可行性。最终筛选到两株产量较高的菌株,最高产量达到453mg/L。