匙羹藤(Gymnema sylvestre(Retz)Schult)是萝藦科的一种藤本植物,主要分布在热带和亚热带地区,在我国主要分布在广东、广西、云南等省,是一种传统的抗炎镇痛药材,在印度也用作抗疟疾、降血糖、蚊蛇咬伤等作用,现代药理显示有降糖、抗蝺齿、减肥的作用。本论文分别对该植物茎的提取物的氯仿和正丁醇萃取部位的化学成分进行了研究,并且采用两种小鼠药理模型评价了广西匙羹藤茎的粗提物和不同萃取部位的降糖活性,采用体外实验测定了部分单体化合物的α-糖苷酶抑制活性,并对它们的消炎效果和抗肿瘤活性进行了初步评价。1、匙羹藤化学成分研究从匙羹藤茎50%醇提物的氯仿、正丁醇萃取部位中共分离化合物30个,鉴定结构25个化合物;已鉴定化合物中有8个新的孕甾烷皂苷,命名为gymsylvestros ides A-H,均为C21甾体皂苷类化合物;另有7个已知的孕甾烷皂苷和3个孕甾烷苷元,3个香豆素,1个黄酮苷,2个烷烃和1个甾醇,所有已鉴定化合物命名如下:gymsylvestroside A(1)、gymsylvestroside E(2)、gymsylvestroside B(3)、gymsylvestroside C(4)、gymsylvestroside D(5)、gymsylvestroside F(6)、gymsyl vestroside G(7)、gymsylvestroside H(8)、stephanoside K(9)、gymnpregoside 8(10)、gymnpregoside L(11)、gymnpregoside I(12)、gymnpregoside E(13)、gym npregoside D(14)、gymnpregoside C(15)、肉珊瑚苷元(sarcostin)(16)、prosapo genin 8(17)、异欧前胡素(18)、水合氧化前胡素(19)、Eryciboside A(20)、Stig masterol(21)、山萘酚-7-甲醚3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(22)、正二十一烷(23)、十七烷醇(24)、β-谷甾醇(25),已知化合物中有5个化合物(化合物17-22)为首次从该植物中分离得到,其中3个化合物(化合物18、19、20)为首次从该属植物中分离得到。2、降糖活性的初步测定肾上腺素型小鼠模型采用腹腔注射肾上腺素建立高血糖小鼠模型,监测在0.5、1、2 h三个不同时间点对血糖的影响。以药材量计,粗提物分别按10、20、40 g/kg剂量给药,氯仿、正丁醇和水萃取部位按40 g/kg给药。实验表明粗提物和正丁醇部位在40g/kg剂量下,给药1 h后显示一定的降糖作用,氯仿和水萃取部II位作用较弱。葡萄糖型小鼠模型采用灌胃给予大剂量葡萄糖溶液建立高血糖小鼠模型,该药材粗提物分别按10 g/kg、20 g/kg、40 g/kg给药量给药,不同溶剂萃取部位按40 g/kg的给药量,测定30 min、1 h、2 h时间点的血糖水平。实验表明粗提物和正丁醇萃取部位在40 g/kg剂量下1 h有明显降糖作用,强于氯仿部位和水部位。3.部分单体化合物药理活性的评价3.1α-糖苷酶抑制活性的评价本研究选择从正丁醇部位中分离得到的孕甾烷皂苷gymsylvestroside A、B、C、D、E用PNPG做底物,阿卡波糖做阳性对照,进行α-糖苷酶抑制活性的初步评价。结果显示在gymsylvestroside A-E的初始浓度分别是1.02、1.07、1.11、1.16、1.12 mg/m L时的抑制率分别是4.9%、3.8%、6.6%、3.6%、9.5%;相同实验条件下,阿卡波糖初始浓度0.50 mg/m L时的抑制率是26.4%。3.2小鼠耳肿胀实验采用小鼠耳肿胀实验评价了皂苷gymsylvestroside A、B、C、D的抗炎作用,实验采用巴豆油涂抹致炎模型对化合物进行评价,吲哚美辛做为阳性对照,给药剂量37.5 mg/kg涂抹给药,化合物gymsylvestroside A-D的给药剂量分别是10.6、11.3、10.9、11.5 mg/kg,结果显示抑制率是9.6%、5.1%、6.8%、3.6%、5.9%,与阳性组的抑制率55.3%差别很大,表明四个化合物对此炎症模型未表现出阳性效果。3.3抗肿瘤实验通过体外细胞实验测定了皂苷gymsylvestroside A、gymsylvestroside B、gymsylvestroside C、gymsylvestroside D对白血病癌细胞K562的抑制效果,实验采用MTT法进行测定,实验结果显示化合物gymsylvestroside A-D在大约10 ug/m L的作用浓度时,对K562肿瘤细胞的抑制率在23%-26%之间。文献报道,匙羹藤的药效活性部位匙羹藤酸有较好的降糖效果,是多种皂苷化合物的综合作用。到目前为止,除了环醇化合物牛弥菜醇A,还少有其他降糖活性化合物的报道。本研究通过肾上腺素和葡萄糖所致高血糖小鼠模型对匙羹藤不同萃取部位进行了评价,选定有一定降糖作用正定醇部位作为研究对象,对该部位的化学成分进行了研究,分离得到了新的C21甾体皂苷类化合物。该类化合物在萝藦科植物成分中已有报道,但在该植物中为首次发现。其药理活性比较明显,特别是抗肿瘤活性,实验对得到的单体C21甾体皂苷进行了α-糖苷酶抑制活性、抗炎效果和抗白血病癌细胞K562活性进行了初步评价,实验结果可供今后的研究借鉴。