抗草甘膦野生大豆种质挖掘及抗性机制研究

来源 :东北农业大学 | 被引量 : 13次 | 上传用户:wangxinjia
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农田杂草一般使经济收入损失30%之多。由于研制出一个新除草剂的成本,是选育出抗除草剂作物一个新品种的20-100倍,因此,发展抗除草剂作物,不仅能够节约农药的使用量,提高劳动生产力,同时能保护作物免受除草剂伤害,具有重要的经济和社会价值。本研究采用田间试验方法,对野生大豆材料进行抗草甘膦鉴定,并对其抗性程度、抗性稳定性进行深入研究。同时对抗草甘膦靶标酶及相关酶系进行分析,明确抗性产生的生理机制,对植株体内保护性酶和解毒代谢酶及内源激素进行分析,明确抗性产生的生化机制,利用生物信息学方法对抗感材料中靶标基因EPSPS表达量进行分析,从而进一步在分子水平上明确其抗性产生的原因。为今后克隆抗性基因和培育抗除草剂作物育种提供理论依据和试验材料。本研究取得的主要研究结果如下:1、在草甘膦1.23kg a.i hm-2处理下,对92份野生大豆进行抗草甘膦基因的筛选,发现不同野生大豆材料对草甘膦抗性具有明显差异,说明这些材料中存在抗性基因,通过田间鉴定,筛选出ZYD254、ZYD0685两份对草甘膦高抗品系,说明对草甘膦的抗性程度较高,并且抗性程度整体趋于稳定,在不同剂量处理和不同年份条件下,抗性品系ZYD254表现稳定,高温下对其有一定的影响。2、对野生大豆抗性材料ZYD254和敏感材料进行ZYD1158的莽草酸积累量、叶绿素含量进行分析,在草甘膦处理后,ZYD254叶片中莽草酸积累量、叶绿素含量与对照相比没有明显改变,谷胱甘肽转移酶活性有所提高。敏感材料ZYD1158叶片中莽草酸积累量显著提高、叶绿素含量下降,因此,莽草酸含量没有积累,可能是对草甘膦产生抗性关键因素。3、抗性野生大豆叶片受到草甘膦胁迫时,叶片中SOD、POD均表现为先降低后增加的趋势,MDA含量呈先增高后降低的变化,敏感野生大豆品系则持续降低。因此,抗性品系野生大豆在草甘膦胁迫后抗氧化酶基本保持较高的活性,清除了活性氧对野生大豆造成的危害,这一因素是抗性野生大豆品系对草甘膦抗性增强的原因之一。在受到草甘膦胁迫后,抗性品系叶片及根中具有较高的GST活性及GSH含量。使得缀合草甘膦能力增强。4、在草甘膦胁迫下,抗性野生大豆品系内源激素短时间内可以恢复并维持一定的平衡状态,IAA和GA的含量与敏感野生大豆品系相比有较高的增加,ABA含量稍有降低,而敏感品系IAA和GA的含量呈降低的趋势,ABA的含量不断增高。5、通过生物信息学方法对野生大豆中的GmEPSPS基因两个拷贝进行分析,结果表明抗性野生大豆材料中的EPSPS1基因相对表达量与敏感材料相比提高2-3倍。
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