【摘 要】
：
癌症已成为人类生命健康的主要威胁,目前常规治疗手段包括手术、放疗、化疗和过继免疫疗法,但临床治疗效果尚不理想。过继免疫治疗因其疗效好、毒副作用小等优点,正逐步成为恶行肿瘤领域研究的热点。获得对肿瘤细胞致敏的效应T细胞是决定过继免疫治疗效果的关键因素,肿瘤引流淋巴结（Tumor-draining lymph node,TDLN）是位于肿瘤引流区的淋巴结,由于TDLN处于机体内部特殊的位置,在经过肿瘤
论文部分内容阅读
癌症已成为人类生命健康的主要威胁,目前常规治疗手段包括手术、放疗、化疗和过继免疫疗法,但临床治疗效果尚不理想。过继免疫治疗因其疗效好、毒副作用小等优点,正逐步成为恶行肿瘤领域研究的热点。获得对肿瘤细胞致敏的效应T细胞是决定过继免疫治疗效果的关键因素,肿瘤引流淋巴结（Tumor-draining lymph node,TDLN）是位于肿瘤引流区的淋巴结,由于TDLN处于机体内部特殊的位置,在经过肿瘤细胞抗原长期刺激后会产生含有已摄取肿瘤抗原相关信息的树突状细胞（Dendritic cell,DC）和大量对肿瘤致敏的免疫细胞如T淋巴细胞、B淋巴细胞、自然杀伤细胞（Natural killer cell,NK）,因此TDLN是一种更方便获得对肿瘤细胞致敏的免疫细胞的潜在途径。嵌合抗原受体T细胞（Chimeric antigenreceptor-T cell,CAR-T）是指经基因工程化修饰后,能以MHC非限制性方式识别特定目的抗原,并且持续扩增活化的一类T细胞。将T细胞经过CAR改造后赋予T细胞对白细胞抗原（Human leukocyte antigen,HLA）非依赖的方式靶向并识别肿瘤相关抗原的能力,以达到抵御和消除肿瘤的效果。CAR-T相比于自然静息状态下T细胞表面受体（T cell receptor,TCR）能够更特异性精准识别特定的目标,随着CAR-T探索的深入拓宽和改良优化,这种疗法最终将在很大程度上造福于癌症患者,并最终有望实现攻克实体瘤。研究目的:本课题基于CAR-T过继免疫疗法,用嵌合抗原受体修饰TDLN中对自体肿瘤细胞致敏的效应T细胞,探索建立具有对自体肿瘤细胞致敏优势的嵌合抗原受体免疫细胞及其体外抗肿瘤活性。研究方法:本实验通过分子克隆技术构建过表达luciferase和鼠源CD19抗原慢病毒表达载体LentiV3-Luc-mCD19,利用慢病毒包装系统侵染筛选获得稳转luciferase和鼠源CD19抗原的4T1-Luc-mCD19细胞系;将Balb/c小鼠皮下荷瘤后从腋窝引流淋巴结内取出TDLN,CD4+/CD8+磁珠分选得到TDLN-T细胞;从正常小鼠脾脏内用磁珠分选获取静息状态下spleen-T细胞,流式细胞术检测免疫表型。同时构建了含有mCD19scFv二代CAR结构的逆转录表达载体pMIG-mCD19scFv-CAR,通过逆转录病毒包装、浓缩侵染spleen-T细胞和TDLN-T细胞,获得靶向鼠源CD19的spleen-CAR-T细胞和TDLN-CAR-T细胞,并用流式细胞术检测转染效率。共培养实验按照不同效靶比来检测spleen-T细胞、TDLN-T细胞、spleen-CAR-T细胞和TDLN-CAR-T细胞的杀伤率,并用ELISA检测共培养上清中IFN-γ和IL-2的含量。研究结果:（1）成功构建了慢病毒表达载体LentiV3-Luc-mCD19和逆转录病毒表达载体pMIG-mCD 19scFv-CAR。（2）成功筛选出稳转luciferase和鼠源CD 19抗原的4T1-Luc-mCD19细胞系并为获取TDLN建立小鼠实体瘤模型。（3）从小鼠体内成功分离出静息状态下的spleen-T细胞和对肿瘤致敏的TDLN-T细胞,并通过逆转录病毒转染得到spleen-CAR-T和TDLN-CAR-T细胞,流式细胞术检测T细胞免疫表型和转染效率。（4）共培养结果表明TDLN-T对自体肿瘤细胞杀伤效率高于spleen-T,且以TDLN-T细胞为来源构建CAR-T细胞其杀伤效果高于自然状态下的CAR-T细胞。结论:荷瘤小鼠TDLN内能获得大量免疫细胞,TDLN-T相比于正常小鼠spleen-T细胞具有对自体肿瘤细胞更好的识别及杀伤作用,并且经嵌合抗原受体修饰后能比静息状态下CAR-T细胞显示出更好的抗肿瘤活性。
其他文献
在直播带货模式中，消费者信任是发展的基础及目标，也是难得的资源与资产。本文基于新网红经济视角，探究直播带货模式中消费者信任的衍生机制。研究发现，机制系统由互联网技术赋权、圈层化分割、人格与话术、回声室效应以及私域流量池构成，这些要素紧密相连、环环相扣，推动消费者信任的产生、增强、留存及转化过程。该衍生机制也存在一定风险，需要采取相应应对策略。
目的:通过大鼠正畸牙移动模型研究β-肾上腺素受体（β-adrenergic receptor,β-AR）阻滞剂对骨硬化蛋白（Sclerostin,SOST）和核因子κB受体活化因子配体（Receptor activator of nuclear factor kappa-B ligand,RANKL）的调控机制,以及对正畸牙移动的影响。方法:32只8周龄雄性Sprague-Dawley大鼠按照随机
全媒体时代，互联网掀起了新一轮直播热潮。作为语言传播的排头兵，央视也参与到直播带货的队伍中，推介优质国货和农货品牌，得到了受众的广泛关注与支持，同时也引发了人们对传统媒体主持人应该如何转型的思考。其中，“央视boys”直播带货颇受认可。他们的实践策略是建构多元媒介形象，促进个人IP塑造；强化互联网思维，推进多方互动；注重语言文化内涵，彰显语言传播价值。这些创新路径也给全媒体时代的语言传播者探寻自身
目的:通过对变应性鼻炎（allergic rhinitis,AR）患者血清外泌体来源的特异性circ RNA表达谱进行分析,筛选出参与到AR发生发展过程中的circ RNA,并探究其作用机制,为AR的精准诊疗提供理论依据及新的研究方向。方法:收集2020年6月至2020年12月经泰州市人民医院耳鼻咽喉科确诊为变应性鼻炎且符合纳入标准的5例患者为AR组,另选5例同期非AR（如甲状腺肿物、会厌囊肿、鼻
＜正＞随着我国社会的不断发展,我国在国际经济体制中的地位逐渐提升,无论是人们的生活品质还是生活追求都发生了很大改变。在新课改背景下,实施素质教育已经成为了育人核心,并且教育部门也提出了有效的人才培养战略。但是结合目前的教育现状来看,学校的德育教学水平还有待提高。英语是初中教育体系中的重要学科,教师应结合其教学活动有效渗透德育思想,以此帮助学生形成正确的价值观与德育观,提升其核心素养。
在中央苏区时期，作为苏维埃红色政权的“喉舌”，《红色中华》对其对立面国统区的恶性经济事件进行了充分的报道。一是大量披露国民政府对底层民众的残酷剥削；二是密集报道白区面临的自然灾害；三是广泛宣传国统区深陷经济危机的囹圄。这些报道鲜明地体现了苏维埃红色媒体的性质，为广大的革命根据地人民了解国统区的经济真相提供了窗口，并将丑陋的白色世界与朝气蓬勃的中央苏区进行了直观对比，增强了民众对苏维埃世界的向往，进
在信息化环境下的教育改革,对人才培养的要求不断提高,更加重视学生核心素养的培养。历史学科作为培养学生核心素养的重要人文学科之一,受到了专家学者和广大教师的关注。问题链教学作为一种现代教学方法,与现代人才培养模式有着内在的契合。问题链教学以教学内容为基础,以问题为链条,以问题解决为驱动,整合教学内容,帮助学生形成的完整的知识结构,问题链教学成为中学历史课堂教学的重要方向之一。本文共五部分,第一部分为
＜正＞[摘地包蕴民主、平等、关爱、尊重、赏识、信任、和谐、共赢等特征。文章解读了共生性师生关系的六条建设路径，为新时代教育焕发活力指明了方向。
＜正＞记者:经济犯罪检察工作关乎经济发展和社会稳定,关乎广大人民群众的切身利益。2019年,第四检察厅主要做了哪些工作?郑新俭:2019年,第四检察厅在检察工作整体布局下谋划和推进工作,坚持以案件办理为抓手,做优做专经济犯罪检察工作,主要做了以下工作:一是"惩、化、防、治"多措并举,积极防范化解重大金融风险。突出办案重点,坚持"穿透式"办案理念,严肃查办各类非法吸收公众存款、集资诈骗等涉众型、跨区