EGCG-CS-PAA纳米粒的制备及其生物活性研究

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EGCG陛质很不稳定,易受光、氧、温度、pH、金属离子等外界因素的影响从而严重限制了其应用的前景。在参考前人研究的基础上,发现壳聚糖纳米技术能较好的保护EGCG免于遭受恶劣环境的破坏。壳聚糖纳米粒包埋EGCG后,由于纳米粒的优越特性,使得EGCG生物功效得到提高,同时EGCG的释放也变缓,从而提高了EGCG的利用效率。在本研究中,利用壳聚糖CS和聚天冬氨酸PAA之间离子交联制备CS-PAA纳米粒载体,以此装载EGCG,然后对EGCG-CS-PAA纳米粒的稳定性和生物活性等做了相关研究。研究发现,不同的制备参数能显著影响纳米粒的粒径、分散指数和Zeta电位等特性。当质量比(CS/PAA)为1.0、pH为3.5、反应时间为60min、CS分子量为3-5KDa和PAA分子量为30-50KDa时,制备出的壳聚糖纳米粒的粒径和表面电荷等物理特征为最佳。同时,在该制备参数下制备出的EGCG-CS-PAA纳米粒的包封率达到25%,载药量为344.1mg/kg,且其粒径比未包埋EGCG的CS-PAA纳米粒大些。EGCG-CS-PAA纳米粒的体外释放研究表明在模拟胃环境(pH=2.5-4.0)下从纳米粒中释放出来的EGCG含量较少;在模拟肠环境(pH=6.0-7.4)下,纳米颗粒容易发生降解从而迅速释放EGCG。通过采用FRAP和DPPH法对EGCG-CS-PAA纳米粒的抗氧化活性进行分析,两者都显示纳米体系对EGCG的抗氧化活性具有良好的保护作用。同时EGCG-CS-PAA纳米体系能在高温、碱性等恶劣环境下对EGCG起到较好的保护作用。白兔体内试验结果显示,相比于自由的EGCG, EGCG-CS-PAA纳米粒在预防白兔动脉粥样硬化及其降血脂功效方面得到明显的提高。在EGCG纳米粒小鼠急性试验中,在实验最大剂量(60mL/kg)范围内,雌雄小鼠均未出现死亡及异常情况,且给药后对小鼠的体重也无显著影响。同时,细胞毒性试验结果也表明EGCG-CS-PAA纳米粒及所制备的材料均为无毒安全的。本研究结果表明,CS-PAA纳米体系可以作为如EGCG等不稳定功能性药物的载体,有效保护其生物稳定性,为EGCG在医药食品等领域的应用开拓新的途径。
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