HAX-1和Omi/HtrA2在缺氧缺血性脑损伤新生大鼠脑皮质中的表达及参附注射液的保护作用

来源 :徐州医学院 徐州医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:Hmilts
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目的:研究新生大鼠脑缺氧缺血后HAX-1和Omi/HtrA2在脑顶叶皮质神经元细胞胞质中的动态变化,进而探讨Omi/HtrA2和HAX-1在新生大鼠HIBD中的作用及参附注射液(SFI)的干预作用。   方法:参照Rice法和陈惠金法制备新生大鼠HIBD模型,将新生7日龄SD大鼠随机分为假手术组(S)、生理盐水对照组(C)、参附治疗组(SF),每组按术后观察时间点不同进一步分为6h、12h、24h、72h四个亚组,每个亚组8只大鼠。处死时观察每只新生大鼠脑组织的大体形态;采用HE染色,观察假手术组和缺氧缺血组新生大鼠72h脑皮质组织的病理变化;采用免疫组化和Western Blotting法检测各组病变侧脑组织HAX-1和Omi/HtrA2蛋白的表达变化。   结果:(1)脑大体检查:新生大鼠HIBD后C组结扎侧半球脑组织受损严重,在24h时苍白、水肿明显,体积明显大于对侧,SF组大鼠未见上述改变或仅见结扎侧脑半球轻微的水肿;S组大鼠大脑半球左右对称,未见任何病理变化。(2)脑组织病理变化:72h可见缺氧缺血组新生大鼠右侧脑组织细胞排列紊乱,呈网状或索条状,神经细胞肿胀,局灶性细胞核固缩。(3)Western Blot结果示:C组和SF组Omi/HtrA2(6h、12h、24h、72h)、HAX-1(6h、12h)表达水平均较S组升高,其差别有统计学意义(P<0.01);C组Omi/HtrA2在HI后6h开始表达,24h达到高峰,随后开始下降;C组HAX-1在HI后6h即开始增加,随后开始下降,72h仍高于S组。SF组Omi/HtrA2表达水平在12h、24h、72h较C组降低,其差别均有统计学意义(P<0.01);SF组HAX-1表达水平在12h,24h较C组增多,其差别有统计学意义(P<0.05)。(4)免疫组化结果示:C组病变侧大脑皮层胞浆和胞膜中,Omi/HtrA2阳性细胞数在HI后24h达到高峰,以后降低;HAX-1阳性细胞数在HI后6h即有高表达,随后下降,与S组差别有统计学意义(P<0.01)。   结论:HIBD后大鼠病变侧大脑皮层Omi/HtrA2和HAX-1的表达水平明显升高,参附注射液(SFI)能下调Omi/HtrA2的表达和上调HAX-1的表达,具有保护作用。
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