论文部分内容阅读
目的：探讨皮质酮是否通过其受体介导原代培养的大鼠海马神经元5-HTT、NET、BDNF和IDO的表达；探讨丙戊酸钠是否干扰皮质酮对原代培养的大鼠海马神经元5-HTT、NET、BDNF和IDO的表达调控。方法：1.采用孕期为18天的SD胎鼠培养原代海马神经元。免疫组织化学的方法鉴别海马神经元的纯度。2.MTT比色法检测皮质酮对海马神经元损伤作用的浓度-效应曲线和时间-效应曲线。3.RT-PCR方法和Western-blot法分别检测海马神经元5-HTT、 NET、BDNF和IDO mRNA及蛋白表达。4.检测皮质酮对海马神经元5-HTT、NET、BDNF和IDO mRNA及蛋白表达的影响以及这种影响与皮质酮受体的关系。5.检测丙戊酸钠是否干扰皮质酮对海马神经元5-HTT、NET、BDNF和IDO mRNA及蛋白表达的调控。结果：1.原代培养的海马神经元纯度超过90%,具有良好的外观和功能。2.MTT结果显示,皮质酮呈时间和浓度依赖性降低海马神经元存活率：5μmol/L的皮质酮作用于海马神经元24h和1μmol/L作用48h均显示细胞存活率明显降低。1 μmol/L以下浓度的皮质酮对原代海马神经元没有显著作用。3.RT-PCR结果显示,皮质酮能诱导海马神经元BDNF mRNA表达显著降低,IDO mRNA表达显著升高。这种升高可以被米非司酮翻转,但丙戊酸钠对这种升高无显著影响。皮质酮对单胺转运体mRNA表达没有显著性作用。4.Western-blot结果显示,皮质酮能诱导海马神经元BDNF表达显著降低,IDO表达显著升高,这种升高可以被米非司酮翻转,但丙戊酸钠对这种升高无显著影响。皮质酮对于单胺转运体表达没有显著性作用。结论：1.皮质酮诱导海马神经元BDNF表达降低,IDO表达的升高,而对5-HTT和NET的表达没有影响。2.皮质酮诱导海马神经元BDNF表达降低和IDO表达升高主要是通过激动皮质酮受体而发挥作用。3.丙戊酸钠不能翻转皮质酮诱导的海马神经元BDNF表达降低和IDO表达升高。