【摘 要】
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该论文对四个H5亚型的AIV分离株A/GS/GD/GY/1999、A/PG/GD/KP2000、A/PG/GD/SS/2000、A/GS/GD/QY/2001进行了血清学初步鉴定,HA基因的分离、克隆、序列分析并构建了表达AIV H
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该论文对四个H5亚型的AIV分离株A/GS/GD/GY/1999、A/PG/GD/KP2000、A/PG/GD/SS/2000、A/GS/GD/QY/2001进行了血清学初步鉴定,HA基因的分离、克隆、序列分析并构建了表达AIV HA基因的转移载体.通过RT-PCR的方法用自身设计的一动引物(W+和Q-)一次性扩增出了4个分离株HA的全长基因cDNA.对4个AIV分离株HA基因cDNA用限制性内切酶PstI进行酶切鉴定,结果酶切后产生两条带,一条约500bp,一条约1200bp,与实验预期结果一致.应用DNAclub软件将四个分离株(GY、KP、SS、QY)的HA基因序列以及9个代表株的HA基因序列进行推导后,用NAsis(2.5版)进行比较分析.将SS株AIV的HA基因导入鸽痘病毒插入载体PUC19-Z-P7.5中启动子的下游,得到携带AIV-HA基因的质粒pGEMHASS,经PCR和酶切鉴定,转移载体构建成功.
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