电针不同穴位对功能性便秘模型小鼠肠组织PGP9.5表达的差异研究

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目的:本研究使用冰水灌胃法模拟功能性便秘,研究针刺不同穴位对功能性便秘模型小鼠的肠功能的效应差异及相关肠神经的关系,明确不同穴位针刺治疗功能性便秘效应差异及部分机制。方法:分批选取CL57BL/6野生型小鼠共100只,1批40只造模观察,采用随机法分为10只正常组,其余30只按照冰水灌胃法造模,观察造模情况。2批60只,随机分为5只正常组,余55只重复造模步骤将造模成功者随机分为模型组、上巨虚组、天枢组、大肠俞组各5只,两批均做分笼饲养,放置铁丝网作干湿分离,以便收集粪便。记录并分析各组小鼠造模前后及电针前后小鼠粪便重量、小肠推进率及肠神经元标志物PGP9.5阳性表达变化。结果:1冰水灌胃法可使小鼠粪便质量(干重及湿重)及小肠推进率显著下降(P<0.01,P<0.05)。2.模型组便秘小鼠粪便重量及小肠推进率未恢复正常(P<0.05);针刺各组小鼠粪便质量及小肠推进率有所恢复,针刺各组对小鼠粪便质量比较组间无差异(P>0.05)。“上巨虚”可有效恢复便秘小鼠小肠推进率。“上巨虚”与“天枢”对小肠推进率的恢复效应比较有统计学差异(P<0.05)。便秘模型小鼠粪便重量及小肠推进率未经治疗不能完全恢复大正常状态。3.便秘模型小鼠空肠及回肠肠神经元标志物PGP9.5平均光密度显著下降(P<0.01)。电针“上巨虚、天枢、大肠俞”均可显著提升空肠段的表达(P<0.01),组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。电针“上巨虚、大肠俞”均可显著提升回肠段的表达(P<0.01)针刺“天枢”则显著降低回肠段的表达(P<0.01)。4.模型组小鼠环纵肌间神经丛神经节细胞阳性表达下降且有空泡样改变。电针“上巨虚、大肠俞”可提升空肠及回肠的表达且神经节细胞空泡样改变有所好转。电针“天枢”小鼠空肠阳性表达上升,回肠阳性表达减弱,回肠段空泡样改变无明显改变。结论:1.小鼠冰水灌胃法造模可以使小鼠粪便性状改变、质量下降、小肠推进率降低且肠神经神经节细胞出现空泡样改变及PGP9.5阳性表达降低,从而造成肠功能紊乱。2.针刺上巨虚、天枢、大肠俞均能改善功能性便秘小鼠粪便性状及促进小肠推进率,且对小肠推进率的促进效应,上巨虚穴优于天枢穴。3.针刺天枢与上巨虚对小肠动力的效应差异可能是由于针刺天枢在回肠段的肠神经节细胞空泡样破坏及神经元标志物PGP9.5表达降低引起的。
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