【摘 要】
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第一部分:耐苯妥英钠杏仁核点燃大鼠突触囊泡功能相关蛋白研究目的:检测耐苯妥英钠杏仁核点燃大鼠脑组织突触囊泡功能相关蛋白差异表达基因、与突触囊泡回收相关的蛋白表达,
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第一部分:耐苯妥英钠杏仁核点燃大鼠突触囊泡功能相关蛋白研究目的:检测耐苯妥英钠杏仁核点燃大鼠脑组织突触囊泡功能相关蛋白差异表达基因、与突触囊泡回收相关的蛋白表达,以探讨难治性癫痫突触功能的改变,进一步完善人类对难治性癫痫的认识。方法:建立耐苯妥英钠杏仁核点燃大鼠(难治性癫痫鼠/耐PHT组/I组)和苯妥英钠有效杏仁核点燃大鼠(非难治性癫痫鼠/PHT有效组/P组)模型,抽提两者脑组织的RNA,并纯化mRNA,分别逆转录合成荧光分子掺入的cDNA-链做探针;将含有4096条人类基因PCR产物按微矩阵点样于化学涂层的栽玻片上,制成基因芯片,芯片杂交和洗片后,用ScanArray3000荧光扫描仪扫描芯片荧光信号图象,利用计算机分析耐PHT组和PHT有效组大鼠脑组织差异表达的突触囊泡功能相关蛋白基因;筛选出部分与突触囊泡循环回收相关的蛋白差异表达基因,运用蛋白印迹法、免疫组化法在蛋白水平进一步进行验证。结果:在4096条基因中,耐PHT组和PHT有效组大鼠脑组织间存在明显差异表达的基因共364条,与突触囊泡功能相关蛋白差异表达基因18条,上调的有14条,下调的有4条,其中与突触囊泡循环
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