研究背景随着时代的发展和社会的进步，人们对生活质量的要求也在提高，对口腔问题越来越重视，这使得种植义齿成为修复口腔牙列缺损或者牙列缺失的主要方式之一。种植体与骨组织之间建立直接有序的结构功能连接，即骨整合(osseointegration)，是评价种植体成功的重要指标。临床上，为了减少患者的手术次数及就诊时间，非埋植型种植体这一改良形式在临床应用逐渐增多。然而，对于一些牙槽骨质量较差，种植体植入后初期稳定性较差的患者，传统的埋植型种植体才是最佳的选择。当种植体植入后种植体骨整合随之开始，骨组织的动态改建亦随之发生直至达到最终的平衡，这种平衡的形成受骨局部微环境内自分泌和（或）旁分泌的多种相关因子调节，有研究发现在种植体-骨界面有较高的胶原蛋白I和组织蛋白酶D的表达，但其在骨改建中的作用机制尚不完全清楚。基于以上观点，本实验拟通过直接比较埋植型和非埋植型这两种不同的种植方式种植体，在植入后愈合期中种植体-骨界面胶原蛋白I和组织蛋白酶D的动态变化规律，探讨胶原蛋白I和组织蛋白酶D在界面改建过程中的分子机理。研究目的本实验是拟通过对比埋植型与非埋植型两种不同植入方式的种植体在植入后，愈合期种植体-骨界面中胶原蛋白I和组织蛋白酶D的变化及其规律，探讨其胶原蛋白I和组织蛋白酶D在种植体-骨界面骨改建中的作用和机理。材料与方法1.钛种植体制备采用纯钛制成：长10mm，直径3.75mm的螺纹状植入钉，基桩和植入钉之间由中心螺丝相连。2.实验动物选用健康雄性杂种犬8只，体质量13-15kg，年龄为18-20个月。3.牙体拔除实验犬以3%戊巴比妥钠按1ml／kg肌肉注射进行全身麻醉，用金刚砂片分切牙冠，牙钳小心拔除下颌第4前磨牙和第1磨牙，搔刮牙槽窝，缝合创口。4.种植体植入拔牙3个月后，每只实验犬下颌左侧均植入埋植型种植体3枚，右侧均植入非埋植型种植体3枚，8只实验犬共植入种植体48枚(埋植型与非埋植型种植体各24枚)。5.组织标本制备实验犬分别在植入后1周、2周、1月、3月周时各处死2只。取出下颌相应骨段，在种植体外周10mm处将颌骨截开离断。标本均置于100g／L EDTA中脱钙3个月。梯度乙醇脱水，石蜡包埋。标本采用颊舌向纵切，厚约4μm，裱于经APES涂布的玻片上，等待后续免疫组化染色观察。6.实验方法采用免疫组化ABC法7.对照用封闭血清（10%正常羊血清）代替一抗作为阴性对照8.图像分析与统计学处理采用HPIAS-1000彩色图文分析仪（Olympus,BX40）进行图像分析，结果采用配对t检验进行统计学分析。结果1.埋植型和非埋植型实验组种植体-骨界面组织表达胶原蛋白I和组织蛋白酶D阳性强度均明显高于对照组，且表达出现一定规律。2.埋植型实验组种植体-骨界面中胶原蛋白I1周时出现弱阳性表达，其灰度值为91.25±2.48，随后开始逐渐增加，并在1月时达到峰值112.71±0.57，3月时恢复至81.29±0.81，与对照组水平相近。3.非埋植型实验组种植体-骨界面中胶原蛋白I1周时也出现弱阳性表达，其灰度值为90.72±1.82，随后逐渐增加，1月时达到峰值113.98±0.51，并于3月时恢复至81.04±0.52，与对照组水平接近。4.埋植型实验组种植体-骨界面中组织蛋白酶D1周时出现弱阳性表达，其灰度值为84.38±1.05，随后开始逐渐增加，2周时达到峰值102.53±1.03，后随着时程的延长而逐渐下降，3月时恢复至75.21±0.66，与对照组水平相近。5.非埋植型实验组种植体-骨界面中组织蛋白酶D1周时也出现弱阳性表达，其灰度值为86.81±0.52，随后开始逐渐增加，2周时达到峰值114.49±2.28，后随着时程的延长而逐渐下降，3月时恢复至75.84±1.83，与对照组水平相近。6.愈合期中各时间点埋植型和非埋植型实验组之间胶原蛋白I和组织蛋白酶D的表达无明显统计学差异。结论埋植型和非埋植型种植体在愈合过程中，种植体-骨界面中胶原蛋白I和组织蛋白酶D均有明显的表达，其表达变化随时间的改变而呈现出一定的规律性，影响着种植体骨界面的改建。在埋植型和非埋植型种植体之间表达无显著差异。