腹主动脉瘤(abdominal aortic aneurysm，AAA)是严重危害人类健康的常见疾病。目前的治疗方法主要是外科手术，但传统手术存在着创伤大，并发症率、死亡率高的缺点，因此对直径小于5cm的腹主动脉瘤是否手术存在争议，而新兴的微创腔内隔绝术存在着术后瘤径扩张导致内漏的危险。近年来，关于腹主动脉瘤发病机理的研究使人们认识到，以弹力蛋白和胶原为主的腹主动脉壁细胞外基质成分的改变在腹主动脉瘤的发病中起重要作用，基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase，MMP)参与腹主动脉细胞外基质的降解。这些发现为探索药物抑制小腹主动脉瘤的增大和腔内隔绝术后瘤径扩张开辟了新途径，为解决这一难题带来了希望。 然而，关于腹主动脉瘤发病机理的研究还存在以下不足：(1)国内外尚未见关于在腹主动脉瘤发病早期弹力蛋白和胶原变化的报道。(2)国内外对不同基质金属蛋白酶在腹主动脉瘤发病中的特异性作用的研究还不深入，其抑制剂的研究也存在着非特异性的问题。 为了研究弹力蛋白和胶原代谢在腹主动脉瘤发病早期的作用，以及不同基质金属蛋白酶在弹力蛋白和胶原降解过程中的特异性作用，我们确立了使用腹主动脉瘤动物模型，对腹主动脉瘤发病过程中弹力蛋白和胶原代谢及基质金属蛋白酶的特异性分布进行连续动态观察的课题。本研究共分三部分：1．建立腹主动脉瘤动物模型并进行形态学研究 1) 以大鼠肾下腹主动脉加压灌注弹力蛋白酶的方法建立腹主动脉瘤动物模 型。 2) 标本加压灌注固定后利用计算机图像分析方法进行全面的形态学研究。2．弹力蛋白和胶原代谢在腹主动脉瘤发病中的作用 1) 使用动物模型分别在术后即刻、2天、7天、14天取标本。 2) 切片进行弹力蛋白和胶原双重染色。 3) 染色切片进行计算机图像分析，计算不同时段腹主动脉的弹力蛋白及胶博士学位论文 细胞外基质代讨在腹主动脉召发肩中的作用 扩耍 原含量及与腹主动脉扩张率的关系。3．MMPZ、MMPg在腹主动脉瘤组织中的定位及半定量研究 1）将不同时段的腹主动脉瘤标本进行MMP毛和MMP习免疫组化染色。 2）染色切片进行计算机图像分析，计算腹主动脉全层及中膜的MMPZ和 MMPg相对含量。研究结果显示；1．在灌注结束后即刻测量大鼠腹主动脉的直径发现，腹主动脉的扩张率在 20－30％，在术后第14天解剖大鼠时发现腹主动脉直径扩张100％以上。腹主动 脉瘤中膜弹力蛋白和胶原的相对面积明显少于正常大鼠。实验同时发现，腹主 动脉中膜弹力蛋白和胶原在腹主动脉不同周向方向上的分布也不均匀，对照组 大鼠腹主动脉的前壁中膜弹力蛋白和胶原相对面积高于后壁，实验组组中膜弹 力蛋白和胶原在周向方向上分布无显著差异。2．实验组动物和对照组动物的腹主动脉中膜弹力蛋白相对面积在术后即刻均有 显著下降，实验组从术后第2天始持续下降，而对照组在术后2天、7天、14 天时腹主动脉中膜弹力蛋白相对面积无显著差异。实验组动物和对照组动物的 腹主动脉中膜胶原相对面积在术后即刻均无明显减少，实验组动物腹主动脉中 膜胶原相对面积从术后第2天始持续下降，而对照组动物的术后腹主动脉中膜 胶原相对面积与术前无显著差异。腹主动脉直径扩张率与中膜弹力蛋白相对面 积呈显著的直线负相关（r＝0．91，P＜0．01）。将腹主动脉直径扩张率与弹力蛋 白相对面积、总量、胶原相对面积3项参数建立多元回归方程分析，发现弹力 蛋白的相对面积与腹主动脉直径扩张率的相关性最强。3．在正常腹主动脉组织中，仅含有极少量的MMP－2而未发现WP－9染色阳性。腹 主动脉瘤组织中MMP－2和WP－9均有较大面积的阳性染色，但分布不同，动脉 壁全层MMP－2和删Pg的含量无显著差异（P＞0．05），但腹主动脉中膜MMP－2含 量明显高于 hP－9（P＜0．05）。根据以上结果，留论如下：1．弹力蛋白酶肾下腹主动脉加压灌注法可建立与人体腹主动脉瘤病理变化类 似的腹主动脉瘤动物模型，建模成功率高，动脉瘤形态稳定。形态学研究上海长海医院血旮外科－2· 博土学位论文 细胞外基质代谢在胆主动脉刃发病中的作用 拘要 显示，腹主动脉瘤的形成是腹主动脉的病理性重建，而非简单的弹性扩张。O 2．在腹主动脉瘤扩张过程中，弹力蛋白总量、相对含量、胶原相对含量均有 显著下降，但弹力蛋白相对含量下降是导致腹主动脉扩张的主要因素。 3．WP－2大部分位于腹主动脉中膜，而WP－9大都分布于腹主动脉外膜。因为中 膜弹力蛋白的降解是腹主动脉扩张的主要因素，因此认为以腹主动脉中膜弹力 蛋白为主要底物的基质金属蛋白酶在腹主动脉瘤发病中起主要作用。根据 WP《和WP个的不同分布特点，可以判断WP《在降解腹主动脉中膜弹力蛋 白中起主要作用。因此对MM