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目的:探讨白介素-32(Interleukin-32,IL-32)和胸腺基质淋巴细胞生成素(thymic stromal lymphopoietin,TSLP)在人角膜上皮细胞炎症反应中的作用及调控机制。方法:(1)不同浓度(2、10、50ng/ml)的IL-32刺激人角膜上皮细胞,应用荧光定量PCR和ELISA检测HCECs中TSLP、IL-6、TNFαm RNA和蛋白的表达变化,同时用免疫组化技术定位TSLP蛋白在人角膜上皮组织中的表达;(2)应用Western blot检测上述各组角膜上皮细胞中caspase-1的活性,加入caspase-1抑制剂VX-765后分别应用Western blot、荧光定量PCR和ELISA检测caspase-1活性、TSLP m RNA和蛋白水平的表达变化;(3)用同种型Ig G抗体(5μg/m L)、TSLP抗体(5μg/m L)、NF-k B抑制剂喹唑啉(NF-k B-I,10μM)以及caspase-1抑制剂VX-765预处理人角膜上皮细胞1小时,然后用IL-32(10ng/m L)刺激HCECs4小时后应用荧光定量PCR检测IL-6和TNFαm RNA水平的表达,刺激48小时后用ELISA检测IL-6和TNFα蛋白水平的表达。结果:(1)IL-32刺激人角膜上皮细胞后可引起TSLP、IL-6、TNFαm RNA和蛋白水平表达升高,呈一定的时间和浓度依赖性,差异有统计学意义(p<0.05),TSLP蛋白在未经处理的角膜组织细胞质中表达,而在经IL-32(50 ng/ml)处理48小时后的供体角膜上皮组织中,TSLP在角膜各层中的表达均显著增强;(2)IL-32促进caspase-1的活化,并且具有浓度依赖性,加入caspase-1抑制剂后,caspase-1的活性明显受到抑制,TSLP m RNA和蛋白水平的表达也明显减少,差异有统计学意义(p<0.05);(3)TSLP抗体、NF-κB抑制剂喹唑啉和caspase-1抑制剂VX-765能够显著抑制IL-32介导的促炎因子(TNFα和IL-6)m RNA和蛋白的表达,而同种型Ig G抗体对TNFα和IL-6的表达无明显的抑制作用,差异有统计学意义(p<0.05)。结论:IL-32和TSLP是参与人类角膜上皮炎症反应的重要的细胞因子,IL-32通过caspase-1信号通路上调TSLP的表达;IL-32通过caspase-1/TSLP/NF-κB信号通路介导角膜上皮的炎症反应。