目的：探讨奥沙利铂耐药细胞株-HCT116产生的耐药机制,观察LETM1蛋白水平变化对其影响。方法：结肠癌细胞株HCT116和奥沙利铂耐药细胞株HCT116-OxR的传代培养；噻唑蓝(MTT)实验检测奥沙利铂对细胞存活和死亡情况,并绘制生长曲线,筛选药物浓度；利用荧光素酶检测试剂盒检测细胞和线粒体内ATP的含量；Western-blot法检测HCT116和HCT116-OxR细胞中LETM1蛋白和糖酵解相关蛋白的表达变化；葡萄糖和乳酸检测试剂盒检测两种细胞内的葡萄糖和乳酸含量；通过线粒体膜电位检测试剂盒测定线粒体耗氧量两种细胞的耗氧量的相对值。结果：比较HCT116-OxR和HCT116细胞株,发现HCT116-OxR细胞线粒体耗氧量降低、线粒体ATP含量减少,而胞浆内ATP含量相对增加；(2)比较HCT116-OxR和HCT116细胞株,发现培养液葡头糖含量减少,相反乳酸含量增加；(3)在HCT116-OxR细胞株内HIF-1α、Glu-1、HK-2及LETMl蛋白表达水平升高,利用3-BrPA抑制糖酵解,则逆转HCT116-OxR细胞株内HIF-1α、Glu-1、HK-2及LETM1蛋白的表；(4)利用3-BrPA抑制糖酵解,增加了HCT116-OxR对奥沙利铂的敏感性。结论：1.HCT116-OxR细胞株通过抑制线粒体功能、增加糖酵解途径产生ATP,导致对奥沙利铂的耐药；2.细胞浆内ATP含量是结肠癌细胞引起奥沙利铂耐药的关键原因；3.结肠癌细胞对化疗药物耐药机制,可能是通过增加LETM1蛋白表达的水平,从而抑制线粒体功能,增加胞浆内ATP含量而引起。