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Fas又称APO-Ⅰ,现命名为CD95分子,是一种能够传递死亡信号的细胞表面分子,属于肿瘤坏死因子受体家族成员,是一种Ⅰ型细胞膜蛋白,其天然配体为FasL,属于肿瘤坏因子家族成员,是一种Ⅱ型跨膜蛋白,通常表达于T细胞、巨噬细胞及角膜等少数免疫特赦部位,当Fas与FasL结合就会导致细胞凋亡。在肿瘤免疫中人们过去认为Fas-FasL途径是CTL杀伤肿瘤的作用机制之一,但最近研究发现一些肿瘤细胞如肝癌、结肠癌细胞也表达FasL,但并不介导肿瘤细胞自身凋亡却能借助FasL-Fas途径反杀伤活化的肿瘤浸润淋巴细胞(TIL),这也是肿瘤免疫逃避的新机制。反杀伤机理的研究可望开辟肿瘤免疫治疗的新途径。长期以来肿瘤免疫治疗研究的着眼点多集中在如何激活淋巴细胞特别是T细胞,但激活的T细胞膜表面Fas表达上调,较静止T细胞更易受致肿瘤细胞的反杀伤。因此我们认为不克服肿瘤细胞的免疫反杀伤,免疫治疗就会失败。由于FasL抗体能竞争性地与FasL结合从而有效阻断FasL-Fas途径传递死亡信号。因此,FasL抗体具有保护T细胞免受肿瘤细胞的免疫反杀伤作用。这一研究潜在的社会效益和经济效益颇大。根据上述理论,国外有学者进行过动物实验并观察到反杀伤作用的存在。而临床研究国内外均未见报道。因此,我们用病人手术切除之新鲜肿瘤组织作为标本分离制备淋巴细胞和肿瘤细胞并分别作靶细胞和效应细胞,观察肿瘤细胞对淋巴细胞的反杀伤作用,实验结果更贴近临床。基于上述认识,本课题从以下几个方面展开了研究:①分析非小细胞肺癌(NSCLC)中肺腺癌及腺癌细胞株A549 FasL的表达情况及其临床意义;②检测肺腺癌细胞及腺癌细胞株A549对TIL的杀伤活性及FasL抗体对TIL的保护作用;③检测肺癌患者外周血中sFas及sFasL的表达情况及临床意义。通过以上研究,我们发现:1.肺腺癌及腺癌细胞株A549 FasL的表达8例肺腺癌患者中,FasL表达阳阳性率为80.2%,而腺癌细胞株A549的阳性表达率也达到了68.4%。提示肺腺癌细胞及A549细胞具有反杀伤免疫细胞的能力。并推测<WP=10>有可能是肺腺癌易发生转移的重要原因之一。2.肺腺癌细胞及A549对TIL的杀伤作用及FasL抗体对TIL的保护作用肺腺癌细胞及A549培养1～2周后,用MTT法测定其对TIL的杀伤活性。8例经IL-2培养的肺腺癌细胞及A549均对肺癌组织分离培养的TIL细胞有不同程度的杀伤作用。但经FasL抗体封闭后的肿瘤细胞对TIL的杀伤作用均有所下降,两组之间存在显著差异(p<0.05)。3.肺癌患者外周血sFas及sFasL的表达18例肺癌患者(其中鳞癌8例,小细胞癌1例,低分化癌2例,腺癌7例),sFas及sFasL的水平显著高于正常人(8例健康志愿者)。提示:可溶性Fas与膜Fas竞争性地与FasL结合,抑制肿瘤细胞凋亡。可溶性FasL可能通过转式机制导致别的表达Fas的免疫细胞发生凋亡。从而使肿瘤细胞躲避免疫攻击。通过本研究,我们得出如下结论:1)肺腺癌细胞及A549细胞高度表达FasL;2)肺腺癌细胞及A549细胞对TIL均有不同程度的杀伤作用,而FasL抗体对TIL具有一定的保护作用,提示Fas-FasL途径是肿瘤免疫逃避的途径之一。3)肺癌外周血中sFas及sFasL显著增高,并可能是肺癌免疫逃避的机制之一。