猪传染性胃肠炎(TGE)是由猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)引起的主要以两周龄以内的仔猪发生呕吐、严重腹泻和脱水为特征的一种高度接触性病毒传染病。该病是引起规模化养猪场猪腹泻性死亡的主要原因。N蛋白是一种磷酸化的酸性蛋白，与病毒基因组紧密结合在一起，组成病毒的核衣壳。N蛋白在不同的毒株中具有高度的保守性，对于TGE的血清学诊断具有重要的意义。本试验的目的是利用分子生物学技术将TGEVYK株的N基因扩增后转化到大肠杆菌表达系统中进行诱导表达和抗原性测定，并以此N蛋白为抗原创立一种TGE的血清学诊断方法。 　　利用RT-PCR技术对YK株TGEV的核衣壳蛋白基因进行扩增，得到1条长度约为1160bp的DNA片段并送交生物公司进行序列测定。利用DNASTAR4.01生物软件对测序结果进行同源性分析。分析结果显示：克隆得到的YK株TGEVN基因与Purdue株、TO14株、TFI株、96-1933株N基因的核苷酸同源性分别为99.6％、97.9％、96.2％和95％。将该核苷酸序列翻译成氨基酸，然后进行氨基酸同源性分析，表明该毒株N蛋白与Purdue毒株、TO14毒株、96-1933毒株、TFI毒株的氨基酸同源性依次为99.0％、97.4％、96.3％和94.5％。 　　将扩增的N基因克隆到原核表达载体pET28a，然后转化到BL21(DE3)大肠杆菌表达细胞中。通过筛选诱导表达温度和诱导剂IPTG的浓度，使N基因在原核表达系统中获得较高的表达效率。通过蛋白质表达定位技术证明该蛋白质以包涵体形式存在。用尿素变性和亲和层析的方法将包涵体纯化，然后对诱导表达的产物进行ELISA和Western-blot检验，证明该表达产物具有猪传染性胃肠炎病毒的N蛋白的抗原活性。